A학점 보장, 생화학 Plasmid 추출 및 DNA 정량 결과레포트

소개글

약학대학 과정의 생화학 실험 레포트입니다.
(다른 자연과학 생화학 실험의 과정과 거의 유사합니다.)
긴말하지 않겠습니다.
A+ 받았던 결과보고서 입니다. 특히 DIscussion(고찰) 부분은 자신있습니다.
받아보시면 후회하지 않으실겁니다.

목차

1. Background & Study Aim
2. Material & Apparatus
3. Procedure
4. Results
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Background & Study Aim
1) Background

Mini-prep
Mini-prep이란, plasmin preparation/isolation 기법 중 가장 적은 양을 박테리아로부터 추출해내는 기법이다. 추출해내고자 하는 플라스미드의 양에 따라 mini-prep, midi-prep, maxi-prep으로 나누어진다. 이 prep 기법들은 kit화 되어 판매되는 것을 구입하여 이용하거나, 연구실에서 직접 완충액들을 만들어 사용할 수 있다.

Alkaline lysis (개요)
Alkaline lysis is a method used in molecular biology to isolate plasmid DNA from relatively small volumes of bacteria.
Alkaline lysis was first described by Birnboim and Doly in 1979 (Nucleic Acids Res. 7, 1513-1523) and has, with a few modifications, been the preferred method for plasmid DNA extraction from bacteria ever since. The easiest way to describe how alkaline lysis works is to go through the procedure and explain each step, so here goes.

1. Cell Growth and Harvesting
The procedure starts with the growth of the bacterial cell culture harboring your plasmid. When sufficient growth has been achieved, the cells are pelleted by centrifugation to remove them from the growth medium.

참고 자료

Mini-prep
웹사이트 Virtual-LAB / Category ‘Molecular Biology’ / Vector DNA Mini-prep [KAIST] / 실험 원리
http://www.virtual-lab.or.kr/demo/Experiment_PnP.asp?gCNum=20104
Alkaline lysis
웹사이트 BITESSIZEBIO / Category ‘Cloning & Expression’ ; BLOG ARTICLE /
‘The Basics: How Alkaline Lysis Works’ / by Nick Oswald / 14.10.08 in Cloning & Expression
http://bitesizebio.com/180/the-basics-how-alkaline-lysis-works/
Q&A
웹사이트 BRIC / 실험 Q&A / Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=208845
Chaotropic salt & Chaotropic state / Silica gel에 DNA가 붙는 원리
웹사이트 BRIC / 실험 Q&A / Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=36230
Washing buffer
웹사이트 BRIC / 실험 Q&A / Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=208845
Elution Buffer
웹사이트 QIAGEN / 고객지원 – FAQ / 참고 및 해석
http://www1.qiagen.com/Plasmid/AnionExchangeResin.aspx
[종합]
위키피디아 / DNA separation by silica adsorption / 2nd paragraph of ‘Operations’
http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_separation_by_silica_adsorption
DNA Quantification - Spectrophotometric analysis
위키피디아 / Nucleic acid quantitation / paragraph ‘Spectrophotometric analysis’
http://en.wikipedia.org/wiki/Nucleic_acid_quantitation
Centrifuge
위키피디아 / 원심분리기 / 개요 - http://ko.wikipedia.org/wiki/원심분리기
Safety of Centrifuge
위키피디아 / Laboratory centrifuge / 1st of paragraph ‘Safrty’
http://en.wikipedia.org/wiki/Laboratory_centrifuge#Safety
‘Vortexing’ 과 ‘Inverting’
for oneself
- Materials / ⑤ Elution Buffer composition
웹사이틑 QIAGEN / 고객지원 – FAQ / What is the composition of Buffer EB? (FAQ ID - 199)
https://www.qiagen.com/kr/resources/faq?id=d8ef773f-6a37-4993-908b-8bbc7bc5c8d6&lang=en