유전학 실험 protocol 모음

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DNA prep for blood
1. 혈액을 3000rpm으로 10min at RT centrifuge.
2. Buffy coat 600㎕를 추출. (plasma가 추출되는 것을 최대한 방지한다.)
3. 혈구층에서 600㎕를 추출.
4. RBC lysis solution 900㎕를 넣고 20sec vortex(층 구분 없이 섞일때까지).
5. 15min incubation at RT(10min후 inverting).
6. 10000rpm으로 3min centrifuge at RT.
7. 상층 제거(10~20㎕정도 남김). 10sec vortex.
8. RBC lysis solution 1.5ml, 20sec vortex.
9. 15min incubation at RT(10min후 inverting).
10. 상층 제거(10~20㎕정도 남김). 10sec vortex.
11. Cell lysis solution 600㎕, 10sec vortex.
12. 60min incubation at 50℃.
13. 1min cooling at RT, 2min cooling in ice.
14. Protein precipitation solution 200㎕ 20sec vortex.

참고 자료

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