Animal cell subculture(동물세포계대배양)

소개글

"Animal cell subculture(동물세포계대배양)"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. Purpose(목적)

Ⅱ. Introduction(소개)
1. Subculture(계대배양)란?
2. Subculture에 쓰이는 각 시약의 조성 및 역할
3. Cell counting

Ⅲ. Materials & Methods(실험재료 및 방법)
1. Material
2. Method

Ⅳ. Result(결과)

Ⅴ. Discussion(고찰)

Ⅳ. References(참고문헌)

본문내용

Ⅰ Purpose
본 실험은 MEF(Mouse Embryonic Fibroblast) C3H cell을 subculture하기 위해 수행되었다. 배양 중이던 MEF C3H cell을 hemacytometer를 사용하여 cell counting을 한 후, 계산을 통해 1.0x개의 세포를 새로운 dish에 seeding했다.

Ⅱ Introduction
1. Subculture(계대배양)란?
동물에서 세포를 떼어 배양접시에서 배양할 경우 어느 정도 증식이 지나 공간이 부족하여 성장 한계에 이르렀을 때 새로운 배양접시로 옮겨 지속적으로 배양하게 하는 방법이다.

2. Subculture에 쓰이는 각 시약의 조성 및 역할
① 15% Low medium
: Low medium에 포함된 FBS가 Trypsin을 비활성화 하는 역할을 한다.
• Trypsin inactivation 이유
Trypsin은 세포막에 노출되어 있는 모든 단백질을 비선택적으로 분해하기 때문에 장시간 Trypsin에 노출되어 있으면 세포가 타격을 입고 결국 죽게 된다. 이 때 15% Low medium을 넣어주면 그 안에 들어있는 trypsin inhibitor가 트립신의 활성을 억제해서 세포가 더 이상의 손상을 입지 않도록 해준다.
• FBS(Fetal Bovine Serum)
본 실험에서 사용한 Low medium에는 FBS가 15% 들어있다. FBS는 Fetal Bovine Serum의 약자로 소태아혈청을 말하는데, 세포 및 조직배양에서 많이 사용되는 혈청이다. 혈청(serum)은 매우 광범위한 고분자 단백질, 저분자 영양분, 그리고 불용성 물질들에 대한 운반체 등을 함유하고 있으며 호르몬과 부착 인자와 같은 세포의 in vitro 성장에 필요한 기타 성분들을 함유하고 있다. FBS는 비교적 다량으로 입수할 수 있기 때문에 널리 사용되고 있다.

참고 자료

1) cell culture http://m.blog.daum.net/gnocchi/3
2) phenol redhttps://namu.wiki/w/%ED%8E%98%EB%86%80%20%EB%A0%88%EB%93%9C
3) cell counting http://blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=deviliana&logNo=130036265249&parentCategoryNo=&categoryNo=13&viewDate=&isShowPopularPosts=true&from=search
4) FBS http://blog.daum.net/aon_dd/35