E.coli Transformation, DNA miniprep, 전기영동 실험 레포트

목차

1. 실험제목
2. 실험이론
3. 기구 및 시약
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

2. 실험이론
2.1. 플라스미드(Plasmid)
플라스미드는 세균의 세포 내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자를 총칭하는 말로, 1952년 조슈아 레더버그 박사가 처음 제안한 말이다. 이는 주로 원형 이중쇄 DNA 분자로 구성되어 있으며 독립적으로 복제를 한다. 세균의 생존에는 필수적이지 않은 여러 부가적 기능의 유전자를 지니었고, 다른 종의 세포 내에도 접합이나 형질도입을 통해 전달될 수 있다. 이런 성질을 이용해 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 자른 뒤 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다.

2.1.1. pUC19(plasmid University of California 19)
본 실험에서 사용한 plasmid는 pUC19로 2686 염기쌍으로 이루어진 원형의 이중나선 DNA이며 재조합 DNA를 cloning 할 때 많이 쓰인다. pUC19는 대장균의 β-galactosidase (lacZ) 유전자의 N-말단을 가지고 있으며, Amp 내성 유전자를 β-lactamase 효소로 암호화한다. ori site는 plasmid pMB1에서 파생되었다. pUC19는 작으나 복제수가 많으며 이러한 높은 복제수는 rop유전자와 돌연변이가 없기 때문에 발생한다.

참고 자료

네이버 지식백과 암피실린 [ampicillin] (화학백과)
네이버 지식백과 겔전기영동 [gel electrophoresis] (두산백과)
WIKIPEDIA pUC19
A.Nishimura, M.Morita, Y.Nishimura and Y.Sugino, 1990, “A rapid and highly efficient method for preparation of competent Escherichia coli cells”, Nucleic Acids Research, Vol. 18, No. 20, pp. 6169
Cold Spring Harbor Laboratory Press Molecular Cloning (Sambrook, Joseph, Russell, David W.)
월드사이언스 유전자 클로닝 입문 (T.A. Brown)