[실험프로토콜] Electroporation competent cell 만드는 방법

소개글

electroppration을 하기 위한 competent cell을 만드는 방법입니다.

그림으로 설명하여 간단하게 따라하실 수 있을 것입니다.

실험관련자료를 한번에 구입을 원하시거나 요구하는 프로토콜이 있으시면 문의주세요.

목차

1. Materials
2. Method
3. Using Materials (machine & accessory)

본문내용

1 day
1. LB broth 5ml에 E.coli 접종.
- 2X YT 배지 3ml
2. 37°C 200rpm shaking incubation, overnight, (seed culture)

2 day
1. LB broth 50ml + 배양액 500ul 접종.
- 2X YT 배지 250ml가 든 1000ml 삼각플라스크에 1%가 되도록 250ul 접종.
2. 37°C 200rpm shaking incubation, 약2hour 30min.
- O.D600≦0.5 (main culture)
3. 배양액 얼음에 10-15min
4. 배양액 35ml을 centrifuge tube에 넣음.
5. 4°C 4000rpm 15min centrifuge.
6. 상층액 제거.
7. 차가운 3D.W 25ml넣고 현탁.
8. 4°C 4000rpm 15min centrifuge.
9. 상층액 제거.
10. 차가운 10% glycerol 25ml넣고 현탁.
- 차가운 10% Glycerol 250ml로 세포 침전물을 완전히 현탁.
11. 얼음에서 10분간 shaking.
12. 4°C 4000rpm 15min centrifuge.
13. 상층액 제거.

참고 자료

없음