효소면역정량법(ELISA)의 원리와 활용 (ELISA-Enzyme Linked Immunosorbent assay) [ELISA][Direct ELISA][Sandwich ELISA][ELISA 원리]

소개글

효소면역정량법(ELISA)의 원리와 활용 에 대해 작성한 레포트 입니다.

목차

1. 효소면역분석법(ELISA)란?
2. ELISA 원리
3. ELISA 장점

4. ELISA 종류, 원리, 그리고 장단점
1) Direct ELISA
2) Indirect ELISA
3) Sandwich ELISA
4) Competitive ELISA

5. ELISA 과정 (Sandwich ELISA 기준)
6. ELISA에 사용되는 효소와 기질
7. Immune complex 를 형성하는 데 영향을 미치는 요소
8. ELISA 활용
9. 참고자료 

본문내용

1. 효소면역분석법(ELISA)란?
- 효소면역정량법 (ELISA)는 오늘날 가장 널리 이용되는 면역정량법이다. 이 방법은 Ag- Ab interaction을 이용하여 Ag or Ab를 정성, 정량 할 수 있는 감도가 매우 우수한 실험법이다.

- ELISA는 1970년대 초 프랑스 (Avrameas와 Guilbert, 1971년)와 스웨덴 (Engvall과 Perlman, 1971년)에 있는 두 그룹에 의해 동시에 고안되었다.

- 이 방법은 항체에 효소를 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 방법으로, 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능하여 현재 가장 널리 쓰이고 있는 항원-항체 분석법의 하나가 되고 있다.

- 항체에 결합되는 효소 중에는 간단한 기질 용액을 넣어주면 색깔을 띄는 반응이 이용되는 데, 대표적인 효소로는 Alkaline phosphatase (AP)나 Horseradish peroxidase (HRP) 등이 많이 이용되고 있다. 이들 효소는 항체분자의 Fc 지역에 공유결합되도록 화학반응을 이용하여 결합시켜 사용한다.

- ELISA는 1970년 이후 많은 변형이 서로 다른 상황에서 개발 되고 사용되어 왔지만 기본적으로 네 가지 동일한 기본 요소 에 따라 달라진다:
① Coating/Capture: direct or indirect immobilization of antigens to the surface of polystyrene microplate wells.
② Plate Blocking: addition of irrelevant protein or other molecule to cover all unsaturated surface-binding sites of the microplate wells.
③ Probing/Detection: incubation with antigen-specific antibodies that affinity-bind to the antigens.

참고 자료

2014’ ELISA Workshop/웅비메디텍 이지은 / 2014년
http://www.leinco.com/indirect_elisa
ELISA/정지은/2013.12.20