[분자유전학] Hair DNA isolation (DNA의 분리)

목차

I. Introduction
II. Material
III. Method
IV. Result
V. Discussion

본문내용

I. Introduction
- Isolation of genomic DNA
모든 생명체의 구성은 세포로 되어 있고, 그 중심에는 DNA라는 유전물질이 중심을 차지한다. 이러한 핵에 내부에는 염색체가 있고 그 내부에는 DNA가 있으며 내부에 다시 4-5만개의 유전자가 있다. 이러한 염색체 내부에 존재하는 DNA를 genom이라고 한다. 이는 생명체의 형태 유지와 활동에 매우 중요한 역할을 한다. DNA의 역할은 생체내부에서 생명 활동에 필요한 단백질을 만들어 구조를 형성하고, 대사 활동에 필요한 효소를 만들어 생명체가 살아 갈수 있는 기본적인 활동을 할 수 있게 해준다. 사람의 genom은 46개의 염색체로 구성되어 있고 이 염색체 안에 차곡차곡 쌓인 기다란 사슬 모양의 2중 나선구조의 분자로 되어있다. 이는 약 32억 쌍의 염기로 구성되어 있고 그 일부분이 생명의 중요한 역할을 담당하는 유전자이다.

<중 략>

Methods
모근 샘플 : 15~20개 모근
1.5ml micro tube에 샘플을 담고 600μl B1 buffer를 넣고 vortex를 이용하여 잘 섞어준다.
실온에서 가끔씩 vortex하면서 5분간 둔다.
10초간 vortex 후 최고 속도(13,000rpm)로 1분간 원심분리 한다.
상층액을 spin column에 넣고 1분간 원심분리 한다.
빠져 나온 용액을 버리고, 600μl Washing buffer를 넣고 1분간 원심분리 한다.
빠져 나온 용액을 버리고, 30초 동안 추가로 원심분리 하여 남아 있는 Washing buffer를 제거한다.
30~50μl Elution buffer를 넣고 5분간 둔다.
(Elution buffer를 미리 60℃ 정도로 예열 후 사용하면 효율을 더욱 올릴 수 있다.)
1분간 원심분리 하여 DNA를 elution한다.
전기영동을 이용하여 DNA를 확인한다.

참고 자료

Trudy Mckee, 최신생화학, 교보문고, 2009,
Weaver. Robert F, 분자생물학, 라이프사이언스, 2003,
이영렬, (최신) 분자생물학 입문, 한빛지적소유권센터,