Immunocytochemistry(IHC) -H&E staining

목차

1. 서론(이론)
2. 재료
3. 실험방법
4. 결과
5. 결과분석
6. 토론

본문내용

1. 서론(이론):
H&E staining은 동물조직학에서 일반적으로 사용하는 염색법으로 잘 알려져 있다.
H&E 염색 혹은 HE 염색에서 H는 헤마톡실린, E는 에오신을 의미한다. 조직학에서 이용되는 기본적인 염색 방법이다. 의학 진단에서 널리 이용되며, 종종 최적 표준(gold standard)이다. 병리학자가 암으로 의심되는 조직을 생검하면 조직 절편을 H&E 염색하고, H&E 절편(H&E section)이라 한다.
H&E staining은 간편하고 신뢰도가 높으며 비용이 저렴하고 많은 정보를 얻을 수 있는 장점이 있다. 절편의 두께와 헤마톡실린 용액의 제조법에 따라 약간씩 다르지만 세포핵은 검푸르게 염색되며 대부분의 세포질 성분은 분홍색 또는 붉은색으로 염색된다. 이 염색법을 이용하여 세포의 핵과 세포질을 관찰할 수 있다.
H&E 염색을 하기 전 시행해야 하는 것들이 있다. 그것은 다음과 같은 순서로 진행된다.
1) 시료 채취
관찰할 시료를 채취하는 과정. 각 조직을 autolysis가 일어나기 전에 빠르게 적출하는 것이 중요하다.
2) 고정(fixation)
세포에 산소 공급이 중단되면 세포 내의 가수분해효소(hydroytic enzyme)을 가두어 놓고 있던 막성분이 유지되지 못하여 가수분해 효소들이 세포내 소기관들을 분해하므로 세포의 구조가 모두 파괴된다. 따라서 고정은 사후변화를 정지시키고 특정 조직성분을 응고(coagulation) 또는 침전(precipitation)시켜 불용성 상태(insoluble state)로 전환하여 조직 세포학적 검사에 적합한 상태로 만드는 것이다. 즉, 생체를 구성하는 각종 조직 또는 세포가 생체상태와 같이 구조가 잘 보존되도록 하는 것이다.
① 고정액의 양 : 조직 용적의 10~20배 (일반적으로는 고정액의 양을 20배 정도하는 것이 좋다.)
② 고정시간 : 조직을 고정액 내에 넣어두는 시간은 고정제의 종류, 조직의 크기나 성질, 고정액의 온도, 검출물질의 성질 등의 조건에 따라 다르지만, 실온 내지 저온(2℃~4℃)에서 표준 고정시간은 4~6시간이다. (실온에 서는 거의 하루 정도 방치한다.)

참고 자료

H&E 염색, 위키백과,
http://ko.wikipedia.org/wiki/H%26E_%EC%97%BC%EC%83%89
(주)이코랩, http://www.ecolabs.co.kr/
면역조직화학염색기법의 이해, 서울대학교 의과대학 약리학교실 신현우, 대한비과학회(The Korean Rhinologic Soceity)
TechNote Immunohistochemistry(IHC), 김유진, 서린바이오사이언스