[KAIST] Cell Culture

목차

1. Cell Culture
2. CHO cell
3. Batch culture: batch, fed batch, confusion batch
4. Inducible vector system: tet-off/ tet-on
5. Reference

본문내용

Cell Culture
Cell culture를 위해서는 먼저 특정한 조직을 떼어내고 잘게 부순 후 protein을 분해 할 수 있는 효소(trypsin)를 이용하여 cell와 cell 사이를 연결해주는 adhesion molecule(protein)을 파괴하여 cell들이 잘 분리된 용액을 만들어야 한다. 이 후 이 현탁액을 배지에 넣어주어 배양하게 된다. 배지에는 보통 NaCl, Na3PO4, CaCl2, MgSO4과 같은 염류와, glucose, vitamins, amino acids와 같은 영양분, 그리고 용액을 중성상태로 만들어 주는 완충용액을 넣어준다. 이 외에도, 세포의 성장을 위해 growth factor를 포함한 fetal bovine serum을 넣는다. 대표적으로 사용되는 이 혈청은 임신한 암소의 심장에서 추출한 혈액으로 FBS(Fetal Bovine Serum)라 불리며 이 혈청은 호르몬, 생장인자, 비타민을 공급해 줌으로써 동물세포의 생장과 활성을 촉진시키는 역할과 함께 호르몬, 미네랄 지방 등을 운반하는 수송 단백질을 제공해 준다. 또한 단백질 분해효소인 protease의 활성을 억제하고(3번 질문과 연관시키면, 트립신(Trypsin)을 억제한다), pH 조절등 완충제 역할까지 한다.

참고 자료

http://www.clontech.com/images/pt/PT3001-1.pdf
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/cell_culture.php
http://en.wikipedia.org/wiki/Cell_culture
http://www.invitrogen.com/site/us/en/home/Products-and-Services/Applications/Cell-Culture/Mammalian-Cell-Culture/mammalian-misc1/cho_cells.html
http://en.wikipedia.org/wiki/Chinese_hamster_ovary_cell
생물 공정 공학(Bioprocess Engineering Basic Concepts, second Edition)