[일반생물학및실험] restriction enzyme digestion 실험 결과 보고서
- 최초 등록일
- 2014.06.23
- 최종 저작일
- 2013.10
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소개글
restriction enzyme digestion 실험 후, A+ 받은 결과 보고서입니다.
실험 고찰을 통해 실험 과정상의 원리와 실험 결과에 관한 분석 등을 자세히 적었습니다.
목차
1) 실험 기구 및 방법
2) 실험 결과 (사진 첨부되어 있음)
3) 실험 고찰
4) 참고
본문내용
1) 실험 기구 및 방법
-실험 기구 : plasmid DNA, 10x buffer, 6x dye, DNA Ladder, TAE buffer, 증류수, 제한효소1(EcoRⅤ), 제한효소2(XhoⅠ), vortex, tube, 원심분리기, incubator, 전기영동기, agarose gel, EtBr, UV illuminator, 실험용 글러브
-실험 방법
1. tube에 plasmid DNA 3μl, 10x buffer 1μl, 증류수 5μl를 넣고, 마지막에 제한효소1(EcoRⅤ), 제한효소2(XhoⅠ)를 각각 0.5μl씩 넣는다.
2. 이 tube를 수 초간 vortexing한다.
3. 이 tube를 약 3~5초간 briefly centrifuge하여 반응할 재료들이 바닥에 모이도록 한다.
4. 이 tube를 37℃에서 30분간 두면서 DNA가 충분히 절단되도록 한다.
5. 이 tube 용액 5μl와 6x dye 1μl를 종이의 매끄러운 면에 올린다.
6. 전기영동기에 agarose gel을 넣고, well이 잠기도록 TAE buffer를 넣는다.
7. 실험방법 5번의 용액 6μl를 세 번째 well에, DNA Ladder 2μl를 두 번째 well에 넣는다.
8. 20분간 전기영동을 실시한다.
9. well에서 agarose gel을 분리시켜, EtBr에 10분간 넣는다.(EtBr은 발암물질이므로, 글러브를 끼고 실험하며, EtBr이 튀지 않도록 유의한다.)
10. 위 Agarose gel에 UV를 쬐어 관찰한다.
참고 자료
인터넷 검색 : http://blog.naver.com/nocks84?Redirect=Log&logNo=70072105284
http://blog.naver.com/ynh1205?Redirect=Log&logNo=130152386982
http://blog.naver.com/redplatypus?Redirect=Log&logNo=40002754705
http://blog.naver.com/gospel89?Redirect=Log&logNo=80083252084
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=62900831&qb=RVRCUg==&enc=utf8§ion=kin&rank=7&search_sort=0&spq=0&sp=1&pid=RDb7CU5Y7vNssuPO6w0sssssssG-361259&sid=UlGKqnJvLDQAAAKqI4M
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=48806442&qb=c3RhciBhY3Rpdml0eQ==&enc=utf8§ion=kin&rank=1&search_sort=0&spq=1&pid=RDbLJ35Y7usssalXRPVssssssus-064664&sid=UlGN73JvLCAAAFguQTc