DNA Composition by HPLC and separation of DNAs by gel electrophoresis

목차

없음

본문내용

(1) DNA Composition Determination by HPLC

1.실험 목적
HPLC를 이용하여 DNA의 composition을 알아보는 것을 통해 HPLC
의 사용법과 원리 이해
2. Introduction
[이론]
HPLC는 column chromatography 형식으로 분리 Adentify 그리고 정략분석 목적으로 쓰인다.
3개의 다른 고정상(대개 carbon 사슬로 포화된 hydrophobic)을 사용한다.
pump가 이동상과 analyte를 column내에서 이동하고, detector가 analyte에 대해 characteristic retention time을 제공한다.
detector의 다른 characteristic 정보도 제공한다.

<중 략>

DNA는 인산기 때문에 그 골격에 음정하를 띠고 있으므로 겔의 끝쪽에 있는 +극을 향하여 이동하게 된다.
겔이 서로 다른 DNA들을 분리할 수 있는 비밀은 마찰력이다. 작은 DNA 조각은 용매와 겔 분자로부터 약간의 마찰력을 받아 빠르게 이동한다. 역으로 큰 DNA 조각들은 비례적으로 큰 마찰력을 받기에 천천히 움직인다. 결과적으로 전류가 DNA 조각들을 각각의 크기에 맞게 분리시키는 것이다. 최종적으로 DNA는 형광염쵸로 염색하여 자외선 하에 볼 수 있게 된다. 오른쪽 그림은 이미 크기를 알고 있는 파지 DNA 조각에 대한 이런 분석을 수행한 것이다. DNA 조각의 이동정도와 조각들의 질양의 로그값을 두 축으로 하여 그래프를 만들 수 있다.

<이하생략>

참고 자료

없음