서울대학교 화학실험 HPLC를 이용한 아데닌과 카페인의 분리 실험보고서 입니다.
- 최초 등록일
- 2013.05.15
- 최종 저작일
- 2013.03
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목차
1. Abstarct & Introduction
2. Data & Results
3. Discussion
4. Reference
본문내용
1. Abstarct & Introduction
여러 물질들이 섞여있는 혼합물을 순물질로 분리 하는 작업은 매우 중요한 일이다. 혼합물 형태로 존재하는 물질들을 분리하는 방법에는 분별증류, 거름, 침전, 원심분리 등 많은 방법이 있다. 그 중에서 크로마토그래피는 한번에 많은 물질을 분리 할 수 있으며 소량의 물질도 분석할 수 있어서 가장 많이 사용되는 중요한 분리 방법이다.
이번 실험에서는 HPLC를 이용하여 아데닌과 카페인을 분리하고 분자의 특성과 크로마토그래피 결과에 어떠한 연관이 있는지 분석할 것이다. 또한 커피를 분석하여 커피 한 잔에 포함된 카페인의 양을 정량해 볼 것이다.
이번 실험에서 쓰이는 공식 중 하나는 Beer-Lambert법칙이다. ? A+εbc
흡광도(A)는 빛이 지나가는 시료 층의 두께(b)에 비례함을 Lambert가 발견하였으며 그 후에 Beer는 흡광도(A)가 빛이 지나가는 시료의 농도(c)에 비례함을 발견하여 이것을 합하여 Beer-Lambert law라고 하였다.
흡광도(A)는 단위가 없으며 b는 빛의 통로길이로서 단위는 cm이고 c는 시료의 농도로서 리터당 몰수(M)이다. 엡실론(ε)은 몰 흡광계수이며 단위는 M(-1)*cm(-1) 이다, 몰흡광계수는 특정파장의 빛을 얼마만큼 흡수하였는가를 나타내는 척도이다.
<중 략>
농도에 따른 피크면적을 아데닌과 카페인을 각각 비교해 보았을 때 270um에서 두 변수 모두 가장 큰 값을 가짐을 볼 수 있었다. 아데닌 같은 경우는 완전한 정비레 곡선을 갖지는 않았으나 대체로 270um에 가까울수록 더 큰 값을 가졌다. 아데닌 곡선의 오차는 실험 1에서와 마찬가지로 아데닌 용액에 일부 카페인이 섞였거나 실험관의 노후로 인해 칼럼관에 카페인이 잔류한 까닭이라고 생각한다.
실험 결과를 통해 아데닌과 카페인 모두 최대 흡수 파장은 270um임을 확인 할 수 있다.
참고 자료
Daniel C.Harris, 분석화학, 자유아카데미, 2001,578p
Ronald A.DeLorenzo, Problem solving in General chemistry, second edition ,296p
R.E.Kaiser, E.Oelrich , Optimization in HPLC, 13p~15p
F.L.Boschke외 4명, Topics in current chemistry, 218p
Eli grushka nelu grinberg, Advances in Chromatography, Tylor&Francis, 31ㅑ1~350p