Mammalian Cell culture, Hemocytometer, cell counting, Cell plating

목차

1. Object
2. Introduction
3. Material and Apparatus
4. Method
5. Results
6. Discussion
7. Reference

본문내용

[Cell culture]
동물이나 식물의 조직, 기관, 세포 또는 미생물 세포를 영양분을 주어 생육, 증식시키는 기술을 일괄하여 조직배양이라 하는데 그 중에서 특히 세포만을 배양하는 것을 말한다.

[Animal Cell Culture]
동물을 구성하고 있는 세포를 생체조직이 아닌 각각의 조건이 충족된 인공배지에서 증식하게 하여 세포의 형태학적 관찰, 세포의 기능에 관한 연구, 각종 질환의 진단 및 관련 유전인자의 확인, 치료목적의 유용한 세포의 수확 및 물질의 개발, 유전자 삽입 및 유전자 치료법 등을 연구하기 위한 테크닉이다

<중 략>

Method
1. 기존의 Media를 제거한다.
2. PBS 600 ul를 넣고 가볍게 wash 후 제거한다.
3. Trypsin 200 ul를 넣고 가볍게 흔들어 준다.
4. Media 600 ul를 넣어 inactivation을 시켜주고 Cell을 다 떼어낸다.
5. 떼어낸 Cell을 E-tube에 옮긴다.
6. Centrifuge (1500 rpm, 2 min)
7. Cell은 건드리지 않고 Media만 제거한다.
8. 1 ml의 media를 넣고 resuspension 후 15 ml conical tube로 옮겨(4 ml의 media가 들어있음) 다시 resuspension 한다.
9. resuspension 된 Cell 11ul를 취해서 hemocytometer로 counting 한다.

<중 략>

4)동물세포는 섬세한 plasma membrane으로 둘러쌓여 있어서 전단력(shear force)에 약하므로 산소 공급을 목적으로 한 심한 교반을 피해야 한다.
동물세포 배양의 생산물
바이러스 백신, monoclonal antibodies, 면역조절 인자(interferon, lymphokine, interleukin), 호르몬, 효소, 등이 있다.
동물세포의 나이계산방법
동물세포는 세포해동을 한 뒤 처음으로 subculture를 하면서부터 1살씩 나이를 먹는다. 나이를 세는 단위는 passage라고 부른다.

참고 자료

http://www.cheric.org/
실험동물학 박병성 저| 서울 | 효일 | 2006,
세포배양의 기본과 분석법의 모든 것 월드사이언스 | 2007.04.25.
세포배양 김승업 저| 자유아카데미 | 2008.02.01.
배양공학 조문구 저| 유한문화사 | 2004.08.30