sonication, affinity chromatography, BCA assay

소개글

배양한 박테리아 헤모글로빈 단백질을 추출하여 정량 분석하는 실험. sonication으로 cell을 부셔서 헤모글로빈 단백질을 추출한 후 affinity chromatography를 통해 정제한 후 uv assay, BCA assay로 단백질의 농도를 측정했다. 그리고 sds page로 실험결과가 제대로 됬는지 혹은 실험 오차가 발생한 곳이 어딘지를 확인할 수 있다.
실험관련 원리 및 시약조사, 주의사항이 모두 조사되있고 discussion이 한페이지가 넘게 잘되있습니다.

목차

1.title

2.purpose

3.principle

4.reference

5.material

6.methods

7.results

8.discussion

9.conclusion

본문내용

sonication, affinity chromatography, BCA assay

2.purpose

대장균에서 배양된 헤모글로빈 단백질을 sonication, affinity chromatograph을 통해 추출하여 BCA assay로 정량분석 해본다.


3.principles

1)sonication
10~20kHz의 음파를 사용하여 유리기구 등의 세정이나 세포나 세포내 구조체 등을 파괴하는 방법. 진동수가 약 20kHz 이하의 가청주파영역을 초과하는 음파를 초음파라고 하는 경우가 있으므로 초음파 처리와 같은 의미로 사용하기도 한다. 세포 파괴에 있어서는 음파와 초음파를 구분하여 고려할 필요는 없다. 공동(空洞)현상으로 생성되는 거품진동에 의해 생기는 소용돌이 유동을 세포 파괴의 원인이라고 생각할 수 있다. 음파 처리장치로는 막대모양 진동자를 시료에 담그는 유형과, 진동자를 설치한 욕조 같은 용기에 시료를 넣어 처리하는 유형이 있다. sonication은 해체를 빠르게 하며 분자간 상호작용을 파괴하고 액체에 나노 입자를 균일하게 분산시킨다. 또한, 결정 형성 과정을 시작하고 조절, 액체에 녹은 가스를 제거하여=고 어떤 화학 반응을 위한 에너지를 제공한다.
생물학적 물질을 비활성화 하거나 교란하기도 하며 세포막을 교란하고 세포 성분을 방출한다. (sonoporation)그리고 DNA 분자를 조각 내는데 사용한다.

참고 자료

없음