MTT assay, 세포 생존률 측정방법, Hoechst 염색 방법

소개글

간호학과 생화학시간에 실험한 거에요
MTT assay 의 원리의 정의 썼구요
MTT assay 의 원리를 이용해 세포 생존률을 측정하는 실험 방법, 순서, 결과 나와있습니다
그다음 Hoechst 염색 방법의 원리, 실험 방법, 결과(사진) 있고
마지막 고찰 있습니다
고찰은 느낀점쓴게아니고 객관적으로 썼습니다

목차

Ⅰ. 세포 생존률 측정방법

Ⅱ. Hoechst 염색 방법

Ⅲ. 고찰

본문내용

Ⅰ. 세포 생존률 측정방법

1. MTT assay 의 원리.

세포의 성장을 알아보는 방법 중 하나. yellow tetrazolium salt MTT는 살아있는 세포에서 물에 녹지 않는 formazan crystal로 환원된다. 이 크리스탈은 나중에 DMSO로 녹여서 생성된 크리스탈의 양을 분광학적인 방법 으로 측정한다. 살아있는 세포의 수가 많을 수록 이 크리스탈의 생성도 많아지므로 이러한 방법을 통해 세포의 성장을 쉽게 측정할 수 있다.
MTT assay는 탈수소 효소작용에 의하여 노란색의 수용성 기질인 MTT tetrazolium을 청자색을 띄는 비수용성의 MTT formazan으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법이다.
MTT formazan의 흡광도는 540nm의 파장에서 최대가 되며, 이 파장에서 측정된 흡광도는 살아있고 대사가 왕성한 세포의 농도를 반영한다. 그러나 측정할 well의 세포의 농도가 너무 낮거나 높은 범위에 있으면 살아있는 세포의 농도와 흡광도 사이의 직선적인 비례관계가 성립되지 않게 되므로 최적의 세포농도를 결정하는 과정을 거쳐야 한다.

2. 실험 방법

1. Seeding
(1) 96 well plate의 각 well에 원하는 적정농도의 배지와 cell을 넣는다.
(2) 24hr 동안 부착시킨다.
(3) hydrogen peroxide를 농도별로 각 well에 첨가한다.
이하생략

참고 자료

없음