면역조직화학염색에서 항원복구의 방법 정리

소개글

의학, 자연과학을 전공한 학생들에게 유용한 정보입니다.

목차

1. 단백 분해효소에 의한 분해
2. 고온 가열 방법

본문내용

항원 복구 기법의 발달

1940년대 프랑켈-콘라드 등은 다양한 실험 조건 하에서 일련의 포름알데히드-단백질 반응을 연구하여 포르말린에 의해 유도되는 교차결합이 여러 단백질의 평균 분자량을 증가시킨다는 것을 알게 되었다. 이들은 또 교차결합이 포름알데히드와 안정된 화합물을 형성하는 마니치 반응에서 아미노메틸올기와 페놀, 이미다졸, 혹은 인돌기 간에 일어난다는 것을 밝혔으며, 마니치 반응의 교차결합이 아미노결합, 아미드 결합 그리고 구아니딜 결합과 같은 다른 교차결합과는 차이가 있고 열 혹은 알칼리 처리에 의해 가역적이라는 것도 알게 되었다.
항원복구 기겁에 사용되는 용어들에는 항원복구 외에도 항원노출, 에피토프 복구, 열-유도 에피토프 복구, 항원회복, 항원 복원 등이 사용될 수 있다.

1. 단백 분해효소에 의한 분해
단백분해효소에 의한 분해는 포르말린 고정으로 일어나는 항원의 차폐 효과에 대항할 수 있는 최초의 방법으로써 폭넓은 범위의 단백분해효소가 사용되고 있는데, 여기에는 트립신 DNA 분해효소, 단백분해효소,K, 펩신, 프로나제, 피신 등이 포함된다. 단백분해효소를 사용하여 항원복구를 한 경우와 그렇지 않은 경우의 면역조직화학 염색결과를 볼 수 있다. 아마도 단백분해효소 처리가 갖는 장점은 단백분해효소에 의해 분자적 교차결합이 끊어져 에피토프가 원래의 구조로 환원됨으로써 항체가 더욱 잘 결합할 수 있게 되는 것과 관련을 갖는다. 피신이 주로 쓰이고 있으며 현재는 열-유도 에피토프 복구 기법으로 인해 대부분의 면역조직화학 연구실에서 단백분해효소의 사용이 감소하고 있다.

참고 자료

없음