아미노산농도측정 (예비)

소개글

본 실험에서는 단백질의 구성성분인 아미노산의 농도 측정하는 방법을 배우고 물성이 서로 다른 세 가지 아미노산에 대해 검정선을 비교한다.

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론
3. 시약 및 장치
4. 실험 방법
5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
본 실험에서는 단백질의 구성성분인 아미노산의 농도 측정하는 방법을 배우고 물성이 서로 다른 세 가지 아미노산에 대해 검정선을 비교한다.

2. 실험 이론

1)단백질의 합성과 분해라는 측면에서 아미노산의 농도 변화 또는 이용가능성의 변화는 해석하기 쉽지 않다. 이론적으로 아미노산의 steady-state농도는 연속적으로 아미노산 플로 공급되는 아미노산과 풀 자체가 아미노산 수용체들을 가지고 있는 세포막에 의해 세포내 풀( intracellular amino acid pool)과 세포의 풀( extracellular amino acid pool)로 구분됨에 따라 더 복잡한 연산이 필요하다. 특히 alanine나 glutamate등과 같이 여러 아미노산의 전환에 이용되는 불필수아미노산들의 농도변화는 거의 의미를 부여할 수없다. 그러나 비교적 논리적으로 법칙들 몆 가지는 인정되고 있다.
가. 특정 아미노산의 특정 단백질속에 많이 들어있다면, 전체 단백질 합성속도를 늦추거나, 분해를 촉진시키는 일련의 작용들은 아미노산 풀내의 glutamine농도가 감소하고 가지상 아미노산(branched chain acid : BACC)농도가 상승하게 됨에 됨은 근육단백질의 분해를 의미하는 것이다.

나. 특정 단백질은 흔하지 않은 아미노산 잔기를 가지는 경우가 있는데 대게 이들 희기 아미노산 들은 단백질이 합성된 다음 translation후 수정과정에서 기존 아미노산이 변형되어 만들어진 경우이다. 단백질이 분해되면, 이들 아미노산에 적합한 tRNA가 없기 때문에 새 단백질의 합성에 다시 이용되지 못하고 아미노산 풀에 축적되거나 특수한 경로를 통해 분해되어 배설된다. 예를 들어 collagen 단백질에 흔히 보이는 hydroxyproline, action이나 myosin단백질에서 보이는 pyridinoline과 deoxypridinoline등이 그 예이다. 이들 아미노산들은 이온교환법이나 HPLC방식 또는 여러 효소정량법을 사용하여 농도를 측정할 수 있고 이 농도변화는 이들 아미노산이 포함된 단백질의 대사 변화를 의미한다고 할 수 있다. 이번 실험에서는 ninhydrin 발색법에 의해 아미노산의 농도를 측정한다.

참고 자료

김해리,최정희, 단백질대사, 서울대학교출판부, p13~14 (1977)
John W. Kimball, 킴볼생물학, 탐구당 , p.71~84 (1996)