pGEMT vector 유전자클로닝_실험REPORT_본문
- 최초 등록일
- 2022.02.06
- 최종 저작일
- 2022.02
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소개글
pGEMT vector를 활용한 대학 내 실습수업중 실시한 유전자클로닝 실험레포트 본문입니다.
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목차
요약본
1) 실험목적
2) 배경 및 이론
3) 최종결과
1. gDNA Isolation & PCR w/ GAPDH, P DNA, D DNA
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
4) 실험과정
5) 실험결과
2. PCR purification
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
4) 실험결과
3. T4 DNA ligation
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
4. pGEMT Transformation
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
4) 실험결과
5. pGEMT Mini-prep
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
6. 제한효소 EcoRⅠ 처리
1) 실험날짜
2) 목적
3) 실험재료 및 방법
4) 실험결과
7. Sequencing
1) 받은 날짜
2) 분석 결과
본문내용
요약본
· 실험목적
상피세포의 유전자 염기서열을 분석하기 위해 입안의 상피세포를 면봉으로 채취하여 genomic DNA를 추출한다. 그런 다음 뉴클레오타이드 하나의 차이(SNP)를 보기 위해 RFLP 제한효소로 자르는 과정을 거친다. MHC와 연관되는 유전자를 target으로 삼은 다음, target gene 중 하나의 유전자를 대상으로 sequencing을 진행한다. 최종적으로 총 실험 참가자 6명의 서로 다른 type의 유전자(homo/hetero)들을 비교하고 분석한다.
· 배경 및 이론
1. pGEM-T Easy vector
→ 실험에 사용하는 vector, 크기는 3018b.p이다.
2. RFLP
→ PCR-RFLP는 유전자 다형성을 검출하는 전통적인 방법이다.
· 최종결과
염기서열 분석 결과 GATCA 서열을 가지고 있음을 확인함.
1. gDNA Isolation & PCR w/ GAPDH, P DNA, D DNA
· 실험날짜 : 21‘11.16
· 목적 : 상피세포로부터 gDNA를 추출해내 RFLP를 확인
· 실험재료 및 방법
준비물 : 멸균된 면봉, 실험용 scissors, e.tube, trizol Reagent, vortex mixer, chloroform, LABOGENE mini centrifuge, 70% ETOH, spin down기계, pipet, heating block, Auto D.W, HGAPDH(F/R), P DNA, D DNA primer, Emerald PCR master MIX, 1.5% Agarosegel, 100b.p Maker, 전기염동 기계
참고 자료
mini-prep
https://www.adsdgene.org/protocols/purify-plasmid-dna/
pGEM®-T Easy Vector Systems - Promega Corporation
https://www.promega.kr/products/pcr/pcr-cloning/pgem-t-easy-vector-systems/?catNum=A13260
PCR-RFLP assay
file:///C:/Users/SEC/Downloads/Detection_of_the_rs10250202_polymorphism_in_protec.pdf
