Sequence 분석

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-다이디옥시 염기서열 결정법을 이용한 DNA 염기서열 결정

DNA 염기서열 결정은 주어진 DNA 단편에서의 정확한 염기서열을 결정하는 것이다.
DNA 염기서열의 개시는 DNA 프라이머를 채택함으로써 결정된다.
정상적인 디옥시리보뉴클레오시드 3인산 전구 물질들 (dNTPs 또는 dATP, dTTP, dCTP 그리고 dGTP)와 DNA 중합효소가 첨가되어 DNA 합성을 수행한다.
정상적인 dNTPs에 더하여 4개의 특별한 다이디옥시리보뉴클레오시드들 (ddNTP, ddTTP, ddCTP, ddGTP)가 소량 포함된다.
특별한 ddNTP는 그들에 부착되어 있는 형광 인식표를 가지고 있다.
ddGTP는 한 파장에서 형광을 내는 형광 인식표를 가지고 있으며 ddATP는 다른 파장에서 형광을 내는 형광 인식표를, ddTTP는 세 번째 파장에서 형광을 내는 인식표를 그리고 ddCTP는 네 번째 파장에서 형광을 내는 인식표를 가진다.
ddNTPs는 3`-OH를 가지고 있지 않으며 그러므로 DNA 합성을 나아가서 봉쇄한다.
형광으로 인식표가 달린 ddNTPs는 커지는 DNA 분자들에 임의적으로 통합된다.

참고 자료

미생물유전학, 주우홍, 월드사이언스, 2006,

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