생화학 제한효소 실험

목차

1. 목적
2. 원리
3. 기구 및 재료
4. 방법
5. 결과
6. 고찰

본문내용

목적
·세균에서 유전을 담당하는 것으로서 염색체 DNA와 plasmid DNA가 있다. 염색체 DNA에는 세균의 생존에 필수적은 유전자들이 존재하지만 크기가 작은 plasmid DNA에는 항생제 저항성유전자, 독소생성유전자, 특이한 대사관련 유전자들이 있다. 이들 두 종류의 DNA는 각각 분리하는 방법이 다르다. 본 실험에서는 일반적인 알칼리 분해법을 이용하여 세균 내의 plasmid DNA를 분리하는 방법을 익힌다.
·Agarose gel 전기영동의 기초를 익히고, 세포로부터 분리한 plasmid DNA를 평판 agarose gel로 전기 영동하여 확인하는 방법을 익힌다.

<중 략>

③. Bromophenol blue가 gel의 2/3 정도에 오면 전기를 끄고 EtBr로 염색했다.
④. 염색이 끝나면 gel을 transilluminator 위에 놓고 관찰했다. 이때 자외선 등을 맨눈으로 직접 보지 않도록 주의 하며 UV protector 등을 덮고 보았다. 경우에 따라서는 나타난 결과를 polaroid 사진기로 찍어서 보관하기도 하며 image analyser를 이용하여 관찰하고 사진 자료를 컴퓨터에 보관 했다.

참고 자료

없음