[레포트자료]생물학 실험 PRC실험 레포트

목차

1. 실험 방법
2. 실험 재료
3. miniprep의 원리
4. 실험결과

본문내용

<실험 방법>
-DNA 추출
1. Solution 1
2. Solution 2
3. Solution 3
4. Washing
5. Elution
-PCR
1. PCR tube에 dNTPs buffer 4 μl와 reaction buffer 5 μl를 넣는다.
2. Template DNA 1 μl를 넣고 forward, reverse primer를 각각 0.5 μl 씩 넣는다.
3. DNA polymerase 1 μl를 넣는다.
4. 증류수 37 μl를 넣고 잘 pipetting 해 준다.
5. PCR machine의 well에 tube를 넣고 반응시킨다.

<중 략>

(5) 반응 첨가물
Tag polymerase 의 저해 물질 SDS (<0.01%)
⇒ 비이온 계면 활성제 Tween - 20 이나 nonidet - P40 의 첨가로 그 저해를 억제
DMSO(2～5%) , PET 6000(5～15%) , 글리세롤 (5～20%) , 포름아마이드(5%)나 BSA(bovine serum albumin) 의 첨가로 반응을 촉진

※ 다중 PCR (multiplex PCR)
: 많은 영기배열을 복수의 primer set를 사용하여 동시에 1개의 반응 tube 내에서 PCR 증폭하는 방법
- 디스트로핀 유전자의 결실 변이를 18종류의 primer를 사용하여 검출
- multiplex PCR의 반응액에는 10%(v/v) dimethylsulfoxide CDMSO)가 함유

참고 자료

없음