박테리아의 형질전환

소개글

형질전환에 대한 실습 레포트입니다

목차

실험의 목적
이론적 배경
실험과정
결과 및 토의
출처

본문내용

실험의 목적
박테리아의 유전형질을 플라스미드(plasmid)를 이용한 유전자 도입방법으로 전환시키고 형질 전환된 박테리아를 선택하는 과정 등을 이해한다.

이론적 배경
박테리아의 형질전환
일반적으로 세포가 외부의 유전물질인 DNA를 받아들여 형질전화되는 과정은 크게 3가지로 구분된다. 첫째, 형질전환(transformation)이란 세포가 외부의 DNA를 세포막을 통해 직접 받아들이는 것을 말하고 둘째, 형질도입(transduction)이란 바이러스에 의해 외부 유전자가 세포 내료 운송되는 과정이며 셋째, 접합이란 두 개의 박테리아 사이의 접합 과정에서 접합관(conjugation tube)을 통해 한 세포에서 다른 세포로 DNA가 옮겨가는 과정이다.

플라스미드를 이용한 인공적인 형질전환
위의 세 과정은 자연 상태에서 발생하지만 본 실험에서는 인공적인 조건에서의 형질전환을 유도한다. 이를 위해서는 외부의 DNA를 받아들일 수 있도록 박테리아의 세포막을 화학적으로 변화시켜야 한다. 가장 널리 사용되는 방법이 polyethyleneglycol(PEG)을 처리하는 것이다. 이렇게 처리된 박테리아를 compentent cell 이라 한다. competent cell에 DNA를 섞어주고 고농도의 2가 양이온(CaCl2)과 온도쇼크(heat shock)를 주면 DNA가 competent cell 내부로 들어간다. 이렇게 형질전환된 박테리아를 형질전환되지 않은 박테리아와 선별하기 위해 외부의 DNA에 selectable marker 유전자인 암피실린 저항 유전자(ampicillin resistance gene)을 이용한다. 즉, 형질전환된 박테리아는 항생제인 암피실린(ampicillin)에 대해 저항성을 가져 암피실린이 들어 있는 배지에서 자라지만 형질전환이 안 된 박테리아는 암피실린 배지에서 자라지 못한다.

참고 자료

두산 동아 백과
http://blog.missflash.com/41
http://opentory.joins.com/index.php/%EB%B0%B0%EC%96%91%EA%B8%B0
http://mybox.happycampus.com/hwarangi/181675