[화학공학 실험]Assay of enantiomer_결과

소개글

두개의 광학 이성질체를 갖는 LATIC ACID 중에서 효소반응을 이용하여 L-LACTIC ACID만 분리해내는 실험결과 리포트입니다

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험방법
4. 실험고찰

본문내용

이 실험은 Lactic acid는 L form과 D form이 같이 들어있는데 화학적인 방법으로는 분리가 불가능하다. 이를 효소 반응을 이용해 분리를 하고 UV-spec로 구한 ABS값을 이용해 농도를 구해보는 실험이다.

위 반응은 가역반응이기 때문에 Pyruvate를 제거해 주지 않으면 다시 역반응이 진행되기 때문에 D-GPT(D-glutamate-pyruvate transminase)효소를 사용하여 Pyuvate를 제거해 준다.


Pippette into wells
Blank
Sample
Distilled water (~25℃℃)
Sample
glycylglycine buffer
NAD+
D-GPT
1600μL*
-
500μL
100μL
20μL*
1500μL
100μL
500μL
100μL
20μL*
위의 조성으로 Blank와 Sample을 제조한다. 3분이 지난 후 흡광도를 측정하고 밑에 L-LDH를 첨가해 반응을 시작한다.
L-LDH
20μL*
20μL*
L-LDH 용액을 Blank와 Sample에 추가시킨 후, 10분후 흡광도를 측정한다. 만약 10분 후에도 반응이 끝나지 않으면 흡광도가 같게 남아있거나 혹은 5분 이후로 계속적으로 증가할 때까지 5분 간격으로 흡광도를 측정한다.

[표.1 Method and Composition]
위의 manual을 따르고 측정한 값으로 농도를 구해보고 위의 reaction mechanism과 enantiomer의 특성과 결과를 분석해본다.

참고 자료

없음