Coli의 guamerin
- 최초 등록일
- 2001.10.05
- 최종 저작일
- 2001.10
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목차
1. Abstaract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Results and Discussions
5. References
본문내용
Alkaline lysis method를 이용하여 E. coli(DH5)에서 plasmid DNA(pGk22E)를 preparation하고, agarose gel electrophoresis를 통해 plasmid가 preparated되었음을 확인하였다. 그리고 preparated plasmid를 CaCl2 method를 이용하여 E. coli에 transformation시키고, w/ Amp LB agar에서 배양하여 transformant를 isolation하였다. Transformant colony를 따서 LB broth에 배양하고, IPTG를 써서 guamerin을 induction한 후, sonication과 ultracentrifuge를 이용하여 E. coli의 proteins를 harvesting하였다. 그리고 Cu2+-affinity column chromatography로 proteins를 분리하고, 용출된 solution을 가지고 guamerin에 의한 elastase inhibition을 qualitative analysis함으로써, guamerin을 성공적으로 expression시켰음을 확인하였다.
참고 자료
· 유욱준. Biomedical Research. 1996.
· Jung HI, Kim SI, Ha KS, Joe CO, Kang KW. Isolation and characterization of guamerin, a new human leukocyte elastase inhibitor from Hirudo nipponia. J Biol Chem 1995 Jun 9;270(23):13879-84
