[미생물 실험] 에탄올 침전법(Ethanol Precipitation)

소개글

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목차

1. 실험 제목
2. 실험 목적
3. 이론 및 원리
(1) DNA Precipitation
(2) Ethanol/Sodium Acetate Precipitation
4. 실험 방법
5. 실험 기구 및 시약
(1) 기구
(2) 시약
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험 제목 :Ethanol Precipitation

2. 실험 목적 : PCR로 원하는 DNA를 증폭한 후에 Ethanol을 이용하여 DNA만을 추출해 낼 수 있다.

3. 이론 및 원리
(1) DNA Precipitation
PCR 생산물을 정제할 때 PCR 반응에 사용한 올리고 DNA 프라이머 및 기질 dNTP를 완전히 제거하지 않으면 안 된다. 왜냐하면 dNTP는 본래의 sequencer반응을 저해하기 때문이다.
DNA는 적당한 salt(염) 농도와 적당한 alcohol 농도 하에서 침전된다. DNA 침전에 쓰이는 조 건들은 다음과 같다.
Ethanol : 2∼2.5 volume
sodium acetate(pH 5.2) : commonly used
sodium chloride : DNA containing SDS
ammonium acetate : triphosphate removal
inhibits T4 polynucleotide kinase and TdT
lithium chloride : RNA precipitation, very soluble in ethanol
inhibits reverse transcription
Isopropyl alcohol : 2∼2.5 volume
일반적으로 DNA를 침전시켜 농축시킬 때는 위와 같은 alcohol 침전법을 많이 사용한다.

참고 자료

http://www.anseo.dankook.ac.kr/~meco/study/DNAseq/abi310.htm