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면역학 MTT ASSAY 실험 레포트

스리스리
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최초 등록일
2024.01.23
최종 저작일
2019.03
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소개글

"면역학 MTT ASSAY 실험 레포트"에 대한 내용입니다.

목차

1.실험제목(title)
2.실험날짜(date):
3.실험목적(purpose):
4.실험 준비물(material-reagent, instrument)
5.실험 방법(method)
6.실험 결과(result)
7.실험 고찰(discussion)
8.참고문헌(reference)

본문내용

실험제목(title): Splenocyte isolation and MTT assay

· 실험날짜(date):

· 실험목적(purpose): aseptic technique과 비장세포 분리방법을 습득하고 mitogen의 농도에 따른 림프구의 증식을 확인하고자 한다.

· 실험 준비물(material-reagent, instrument)
비장, pipet, tube, syringe, serum free media, complete media, strainer, centrifuge, cell lysis buffer, PBS, trypan blue, hematocytometer, 70% ethanol, 가위, 집게, conA, r96 well, 현미경, DMSO, multi pipet

· 실험 방법(method)
① 비장을 잘라서 5ml serum free media가 담긴 dish에 담근 후 잘게 자른다.
② syringe의 뒤쪽으로 비장조직을 짓눌러 갈아낸다.
③ 50ml 튜브에 40um strainer을 연결한 후, pipet을 이용하여 strainer에 거른다.
④ serum free media 10ml로 dish에 남아 있는 cell을 씻어준다.
⑤ 1500rpm, 5분 centrifuge 한 후, 상층액을 suction한다.
⑥ red blood cell lysis buffer 1ml로 세포를 풀어준 후, 실온에서 10분간 기다린다.
⑦ complete medai를 10ml 넣어주어 lysis buffer의 반응을 중단시킨 후, strainer에 거른다.

참고 자료

Kenneth Murphy, Paul Travers, Mark Walport, 『Janeway's immunobiology』, 라이프사이언스, 7판, 9p, 18-20p
약품생화학분과회, 『약품생화학실험』, 신일북스, p.130
감염미생물ㆍ면역약학 분과학회, 『최신면역학』, 라이프사이언스, 2018, p.18-19
김인식 외 11인 , 『핵심면역학』, 대학서림, 2015, p.23-27
Johan van Meerloo, Gertjan J. L. Kaspers, Jacqueline Cloos, 『Cancer Cell Culture』, Cell Sensitivity Assays: The MTT Assay, Humana Press, 2001, p237-245
Journal of preventive veterinary medicine: Effect of sodium silicate on immune activity and safety in mice; Beom Jun Lee외 9명. accepted 22 June 2013.
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1090022&cid=40942&categoryId=32311
https://lymphoma-action.org.uk/about-lymphoma-what-lymphoma/lymphatic-system
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=938610&cid=51006&categoryId=51006
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=435110&cid=60261&categoryId=60261
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=491095&cid=50314&categoryId=50314
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=297310&cid=60262&categoryId=60262
https://en.wikipedia.org/wiki/Mucosa-associated_lymphoid_tissue
https://en.wikipedia.org/wiki/Lipopolysaccharide
https://en.wikipedia.org/wiki/MTT_assay
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=19&page=2
https://www.stemcell.com/performing-total-nucleated-cell-counts-with-a-hemocytometer.html
스리스리
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