(동국대 의생명공학 / 생명공학 / 생명과학 / 생물학과) 간접공배양을 통한 ASC에서 Chondrocyte로의 differentiation (w/o TGF-beta1)

소개글

"(동국대 의생명공학 / 생명공학 / 생명과학 / 생물학과) 간접공배양을 통한 ASC에서 Chondrocyte로의 differentiation (w/o TGF-beta1)"에 대한 내용입니다.

목차

1. 제목

2. 이름

3. 실험목적

4. 실험방법
1) 세포 배양 및 분화
2) 분화된 세포 염색 (Alcian blue staining)

5. 결과

6. 고찰

본문내용

1. 제목 : 간접공배양을 통한 ASC에서 Chondrocyte로의 differentiation (w/o TGF-β1)
2. 이름 :
3. 실험목적 : ASC(Adipose-derived stem cell)의 연골 분화에서 연골 분화 배지에 TGF-β1이 없을 때, Chondrocyte와 ASC의 trasnwell을 이용한 간접 공배양이 분화에 미 치는 영향을 보기 위함.

4. 실험방법 :

1. 세포 배양 및 분화

● ASC seeding

1. ASC_seeding_dish 세포배양액 suction, PBS로 washing
2. Trypsin 넣고 incubator에서 3분간 incubation
3. plate를 툭툭 쳐서 세포가 떨어지도록 하고, 현미경으로 관찰
4. media를 넣고 tube에 세포를 모아서 centrifuge(1300 rpm, 3분)
5. 상층액 제거, media 1 ml 넣어 pellet을 골고루 풀어줌
6. Pellet 10ul과 trypan blue 10ul를 hemocytometer에 넣어 cell counting
7. 15ml conicaltube에 1Χ10⁴cell/ml 되도록 cell과 media를 섞어줌

8. 24 well plate에 세포가 들어있는 media를 1ml씩 넣음
9. 37℃ incubator에서 배양

참고 자료

윤경호, 2003[TGF-β와 BMP-2가 골수 줄기세포의 연골세포 분화에 미치는 영향에 관한 연구], [대한골대사학회지], 10(1), p28-36
이선희. "골수 중간엽 줄기세포의 배양 및 연골세포 분화에 관한 연구." 국내석사학위논문 조선대학교 대학원, 2005. 광주
민병현, 이현정, 김영직, 줄기세포를 이용한 연골의 재생, 2009, p1077-1089
김재호, 2007년 6월, [줄기세포 분화조절 연구실], [미래유망연구실 탐방], 제19권 제2호, p58-61 .