[화공생물공학기초실험] 미생물 분리 평판계수법 A+ 결과레포트

소개글

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목차

I. 실험날짜

II. 실험조원

III. 실험 방법
1. 그람 염색법
2. BCP Agar의 제조(BCP 24.64g/L)
3. NaCl 희석수의 제조(NaCl 0.0085g/mL)
4. 멸균
5. 배지 제조
6. 미생물 희석 및 평판도말
7. 유산균 수 추정

IV. 실험 결과
(1) 10^(-6)으로 희석

V. 고찰

VI. 참고문헌

본문내용

1. 그람 염색법
① 균체를 슬라이드 글라스에 도말하여 고정시킨다. 균체를 진하게 한 곳과 연하게 한 곳이 있어도 좋다.
② 제 1액으로 1분간 염색한 다음 물로 씻는다.
③ 제 2액으로 1분간 담근 다음, 물로 씻는다. 제 2액을 떨어뜨린 다음 즉시 이것을 버리고 다시 제 2액을 떨어트려 1분간 담그면 좋다.
④ 제 2액을 물로 씻은 다음, 살짝 여과지로 물기를 제거하고, 완전하게 건조하기 전에 95% 에탄올 중에 살짝 흔들면서 30초동안 탈색한다.
⑤ 건조를 한 다음 제 3액으로 30-40초동안 염색하고 물로 씻는다. (대비염색)
⑥ 현미경으로 관찰한다.

2. BCP Agar의 제조(BCP 24.64g/L)
① 위의 시약을 150mL 제조할 때 해당하는 양을 계산하여 유리 보틀에 넣은 후 150mL의 증류수를 넣고 잘 저어준다. (*완전히 녹지 않으므로 잘 섞일 때까지만 젓는다.)
② 위의 용기의 입구를 알루미늄 호일로 잘 감싼다. (**뚜껑을 꽉 닫지 않도록 유의할 것)

3. NaCl 희석수의 제조(NaCl 0.0085g/mL)
① 위의 시약을 100mL 제조할 때 해당하는 양을 계산하여 비커에 넣은 후 100mL의 증류수를 넣고 완전히 녹인다.

4. 멸균
① 만든 BCP agar 배지용액과 NaCl 희석수를 Autoclave에 넣는다. (***뚜껑을 꽉 닫지 않도록 반드시 주의하며, 입구 부분은 모두 호일로 잘 감싼다.
② Autoclave 에 121도에서 15분을 멸균한다. (Autoclave 이용시 반드시 조교 동행)
③ 멸균이 끝나는 시간에 반드시 맞춰서 온도를 체크하고, 온도가 60도가 될EoRKwl 기다렸다가 꺼낸다. 멸균 후에는 오염되지 않도록 유의한다. (**온도가 내려가게 되면 agar 배지가 쉽게 굳으므로, autoclave를 수시로 체크하여 온도 및 시간을 확인한다. 이후 실험은 클린 벤치에서 오염되지 않도록 조심스럽게 실험한다.)

참고 자료

화공생물공학기초실험, 동국대학교 - p. 19~25
일반미생물학,Joanne M. Willey - p.557