[A+]연세대 생화학실험 콜레스테롤 비색법

목차

1. Introduction
1) 실험목적
2) 실험원리
3) 배경지식

2. Material & Method
1) 실험재료
2) 실험방법

3. Result
1) 측정 O.D.값과 Standard curve

4. Discussion
1) 혈청시료의 콜레스테롤 함량
2) 혈청시료의 콜레스테롤 농도
3) 결과분석

5. Reference

본문내용

실험목적
실험을 통해 콜레스테롤 표준용액의 standard curve를 그려보고, 식에 나타난 콜레스테롤 수치를 비 교함으로써 혈청 시료의 콜레스테롤 함량을 추정한다.

실험원리
콜레스테롤을 초산에틸-에탄올(CH3COOC2H5-C2H5OH) 용액으로 추출하여 FeCl3(발색 반응 방해물질인 Bilirubin 제거 및 산화작용) 과 glacial acetic acid(cholesterol 발색시약) 혼합용액과 H2SO4을 가하면 탈수 반응이 일어나 3,5-cholestadiene으로 산화되고, 이것은 적갈색 화합물로 전환된다. 콜레스테롤 함량에 따라 적갈색 화합물이 생성되는 정도가 다르므로 비색정량에 이용될 수 있다.

배경지식
1) Cholesterol
척추동물에서 발견되는 대표적 스테로이드 화합물이며 콜레스테린이라고도 한다. 그리스어로 Chloe 는 담즙, Stereos 는 고체라는 의미로, 사람의 담석에서 처음 분리하기 때문에 콜레스테롤이라 부른 다. 분자식은 C27H46O이며 유기용매에는 녹지만 물·알칼리·산에는 녹지 않는다. 콜레스테롤은 수산기 와 이중결합을 1 개씩 가지고 있는 것이 특징이다. 이 수산기가 digitonin 과 특이적으로 반응하여 난 용성의 분자화합물을 만들어 침전하므로 이 성질이 화학분석에 많이 이용된다. 콜레스테롤은 세포의 원형질 및 세포막의 주요 구성성분이며 특히 뇌, 척수, 신경조직에 많이 들어 있다. 보통 유리 상태 나 고급지방산과의 에스테르의 형태로 존재하는데, 그 비는 조직마다 매우 일정하다. 그러나 적혈구 막에서는 동물 종에 따라서 인지질과 콜레스테롤, 콜레스테롤 에스테르의 양적 관계가 상당히 다르 다. 그 작용은 막 구조를 유지하거나 용혈성 물질로부터의 공격을 막는다고 알려져 있다. 생체 내에 서는 콜레스테롤을 출발물질로 하여 스테로이드인 비타민 D, 성호르몬(테스토스테론·프로게스테론 등), 부신피질호르몬, 쓸개즙 산(빌산) 등이 합성된다.

참고 자료

Mary K. Campbell, 『생화학 8판』, Life Science Pblishing Co (2015), p.625-634 
채수규 등, 『표준식품분석학』, 지구문화사 (2006) 
“cholesterol”, 『생명과학대사전』, 여초 (2008) 
“비색법”, 『화학용어사전』, 일진사 (2011) 
국립 식량 과학원, “sterol의 반응”, http://www.nics.go.kr (2018.05.27) 
“cholesterol”, 『두산백과』, http://www.doopedia.co.kr (2018.05.27) 
2018 생화학실험 http://yscec.yonsei.ac.kr