Yeast lysis 및 DNS Assay

목차

1. 실습목적
2. 실습 재료 및 방법
3. 실습 결과 및 토의
4. 실습결론

본문내용

Ultra sonication을 통해 yeast lysis(세포 파쇄)후, fraction1, 2 분리 및 단백질 정량

2. 실습 재료 및 방법
1) 실습 재료
① 시료
d.w.
Tris 30.2g
Ethanol 20ml
DNS buffer

② 도구
비이커
conical tube
96well plate

③ 기기
sonicator
원심분리기
microwave oven
분광광도계

2) 실습 방법
<Yeast lysis 및 fraction 1 분리>
① 냉동해두었던 yeast 고체를 50ml conical tube에 하나로 합친 뒤, d.w. 20ml을 넣고 잘 섞어준다.
② 얼음이 담긴 비이커에 50ml tube를 꽂은 뒤, sonicator의 푸르브를 1/3 정도만 잠기도록 한다.
③ sonicator 30min 처리한다. 이 때, conical tube가 기울어지지 않도록 확인한다.
④ 4°C, 10,000rpm 으로 원심분리 뒤, 상징액을 e.p tube로 옮긴다.
이 때의 상징액이 fraction 1이다.

참고 자료

없음