애기장대의 종자돌연변이체에 대한 분석 및 Genotyping

소개글

생물과학실험이라는 수업을 들으면서 작성한
"애기장대의 종자돌연변이체에 대한 분석 및 Genotyping" 실험리포트

목차

1.실험 목표
2.가설
3.준비물
4.실험과정
5.결과
6.Discussion
7. Reference

본문내용

1.실험 목표

1주차 실험인 애기장대의 종자돌연변이체의 분석실험을 통하여 식물에서의 생식과정을 이해하고 종자의 형태를 관찰하며 감수분열을 통해 새로운 개체의 생성과 돌연변이에 대해 알아본다. 또한 유전자형과 표현형의 비도 관찰후, 결과를 고찰하여보고 실험시간에 간단한 실험방법(punching)을 숙지하며,
Genotype과 Phenotype이 일치함을 확인한다.

2.가설

애기장대는 속씨식물이다. 즉, 겉씨식물(나자식물)의 수정은 중복수정이 되지 않으므로 속씨식물의 특징인 2개의 정핵을 형성하여 2n의 수정란과 3n의 핵을 가진 세포(배젖)를 각각 형성하는 중복수정을 하는 것을 기본으로 한다. 실험시 T1을 이용하며 T2를 얻는다.

3.준비물

애기장대 화분, 핀셋, Puncher, 클리어 용액, pre-mic 20ul
PCR튜브, PCR 기계, 작업매트, 해부현미경, 광학현미경
슬라이드글래스, 커버글래스

4.실험과정

실험1 - Genotyping
1. PCR pre-mix tube를 준비한다.
2. 소독 후 puncher로 애기장대 잎을 살살 뚫는다.
3. 애기장대 조직을 Tube에 넣는다.
4. puncher 소독 후 PCR을 실행한다.
* 조직이 보이게 PCR에 넣는다.

실험2-1 - Phenotyping
1. step1에서 이용한 애기장대의 열매를 3개 고른다.
2. 슬라이드 글라스 위에 올려놓고 열매선을 따라 긋는다.
3. 종자를 빼고 클리어 솔루션으로 처리 후 글라스를 덮는다.
* 너무 세게 덮으면 종자가 파괴된다. (사진첨부)

실험2-2 - Phenotyping
1. 현미경으로 글라스를 관찰한다.
2. 죽은 종자와 정상종자의 숫자를 해서 기록한다.
3. 칠판에 적는다.

참고 자료

유전학의 이해, Robert tamarin 7/e p399~465
BM 생물학 volume 4-3, p45~90
Molecular biology 3/e , David P. Clark, Lonnie D p202~256
Biology Campbell Reece 8/e , p813~830