IEF (Isoelectric focusing) 1. 실험이론 IEF의 원리 모든 단백질들은 구성하고 있는 아미노산에 따라 질량과 pI값이 다르다. ... IEF는 Gel에 loading 가능한 단백질의 양이 적어서 spot을 찾더라도 분석이 불가능하고 재현성이 낮은 한계를 지니고 있다. ... 따라서 이 두가지 요인을 이용하여 단백질 분리가 가능한데, pI를 이용하여 단백질을 펼치는 방법을 IEF라고 하며 질량을 이용하여 단백질을 펼치는 방법을 SDS-PAGE라고 한다.
실험 방법 1. 1D (IEF) 1. ... 실험 목적 및 원리 목적 IEF (Isoelectric focusing) 분리 (1D) & SDS-PAGE 에 의한 단백질 분리(2D) 원리 Pi에 의한 분리 (IEF) 단백질을 분획하기 ... - Put the IPGs to IPG-phor, for IEF about 22-25h - 30V, 12 h (rehydration step) - 500V, 1h - 1000V,
원형 질량 분석 , 환산 질량 분석 크기 배제 크로마토그래피 (SEC) SDS- 모세관 전기영동 (CE-SDS) 이성질체상 이온 교환 크로마토그래피 (IEX) 모세관 등전집중 ( cIEF ... ) IgG2 동형의 식별을 위한 역상 LC/MS 프로파일링 흡광 계수 단백질 농도 분석 전기영동 SDS- 모세관 전기영동 (CE-SDS) 모세관 등전집중 ( cIEF ) 액체 크로마토그래피
재현성이 낮다. ② IEF 한계의 극복 : IPG (immobilized pH gradient gel) Gel에 loading할 수 있는 단백질의 절대량이 약 100배 증가 (mg ... 단백질을 분리하는 것은 단백질이 가진 2가지 특징, 다시 말하면 전하와 분자량의 차이 를 이차원 전기영동은 통상 1차원적으로 등전점 전기영동(Iso Electric Focusing : IEF