[실험기법] 동물세포배양-기구 및 시약의 준비(6장짜리)

목차

1. 기구의 세척법
1) 유리 기구의 세척법
2) Pipette의 세척법
3) 요약

2. 기구의 멸균법
1) 건열 멸균법
2) 습열멸균법
3) 여과멸균법
4) 기타 살균 소독법
5) 요약

3. 시약조제법
1) Trypsin 용액 조제법
2) Trypan blue용액 조제법

본문내용

1. 기구의 세척법
동물세포의 배양에서, 특히 무혈청 배양에 대하여 기구의 세척은 실험을 성공시키는 중요한 작업이다. 여기에서는 유리기구의 세척을 중심으로 기구의 세척방법에 대하여 기술한다.

1) 유리 기구의 세척법
기구의 세척은 정성을 들여야 하며 독성물질의 오염을 막아야 한다. 브러시 등으로 세척하는 경우에는 분말 중성세제를 사용하고, 물에 담가서 세척하는 경우는 MERCK 사의 Extran MA20(Nutral)을 20-50배로 희석하여 사용하고 있다. 세척할 때 이용하는 세제는 어는 것이나 세포에 영향을 주는 독성이 높기 때문에 충분히 세척을 하여야 한다. 배양의 경우에만 한정된 일이 아니지만, 사용이 끝난 유리기구 등이 건조되면 오염된 것을 닦아내기 어렵고 중성세제에 의한 세척방법은 오염물질이 잘 떨어지지 않기 때문에 사용 후에는 바로 물 또는 세척액에 담가서 건조를 막아야 한다. 물과 세척액에 기구를 담가 놓을 때에는 배지병과 원심관 등은 안의공기를 없애고, 용액 중에 기구 전체가 완전하게 담겨져야 한다. 이러한 작업은 세척의 기본 의미와 일치하므로 주의해야 한다.
세척은 브러시 등으로 청결하게 닦고, 더욱 중요한 것은 세제가 남아 있지 않도록 하는 것이다. 배지병 등 대형의 것은 수돗물에서 적어도 20회는 헹구고 그 후 탈이온수에서 5회, 최후에 초순수 또는 증류수에 2회 정도 세척한 뒤에 건조시킨다.

참고자료

· 세포공학개론