위생학보고서 MPN

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실험을 하면서요

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본문내용

실험목적
식품 중 대장균군의 수를 확률적으로 산출
실험재료
1. 시료 : 손씻은 물
2. 기구 및 시약 : Incubator, Clean bench, Durham tube, 피펫, 펩톤수, 배지(Lactose broth), 70% alcohol(소독)
1단계
1. 시료 채취는 무균적으로 하고 멸균된 용기에 넣어 냉장 보관한 상태에서 6시간 내에 실험실로 운반하여 2시간 내로 실험을 완료해야 함
2단계
1. 실험관 준비 : 시험관 안에 미리 배지를 채우고 Curham 소형 발효관을 거꾸로 집어 넣고 멸균함
- 실험에 사용되는 발효관 수는 각 (동일)희석액에 따라 5개씩 준비한다. (시험관의 수가 많으면 많을수록 실험의 정확도는 높아짐)
2. 2배 농축한 lactose broth 배지 10mL가 함유된 시험관에는 시료 10mL를 접종하고 1mL, 0.1mL씩 차례로 lactose 배지가 함유된 시험관에 접종한다.
3. 배양 : 35±0.5℃에서 24±2시간
- 24시간 경과 후 : gas 발생여부 확인
gas가 발생하지 않았을 때 더 배양 - 48시 간까지 관찰

▶ gas가 형성된 발효관 수 측정 - MPN 표를 보고 시료 100mL(or 100g)속에 존재하는 대장균수 산출
MPN표 : 시료 10mL, 1mL, 0.1mL 씩 접종하였을 경우 검체 100mL 중의 대장균수를 나타냄

▷ 접종량이 1mL, 0.1mL, 0.01mL일 때에는 표에서 얻은 수치를 10배로 하면 됨

참고 자료

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