PCR and Sexing
- 최초 등록일
- 2008.06.16
- 최종 저작일
- 2008.05
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소개글
PCR and Sexing
목차
PCR and Sexing
Ⅰ. Introduction
1.1. 이론
1.2. 목적
Ⅱ. Materials and Methods
2.1. Materials
2.2. Methods
Ⅲ. Results and Discussion
Ⅳ. Questions
본문내용
Ⅰ. Introduction
1.1. 이론
PCR (Polymerase Chain Reaction) : 이번 실험에서, mtDNA (mitochondrial DNA) 를
이용하여 Cytochrome b 의 double stranded DNA (dsDNA) 를 합성할 것이다.
Taq DNA polymerase 는, 온천에서 사는 박테리아인 Thermus aquaticus에서 발견한
것으로, 72℃(가장 빠른 중합 온도) 이상의 온도에서 이미 존재하는 primer 의 3‘ end에
dNTP 를 붙여 주형(dsDNA of Cytochrome b)을 만들 수 있다.
ZFX/Y (Zinc finger gene) : X chromosome 에 존재하는 Zinc Finger X 와
Zinc-finger gene 에 결합된 Y chromosome 은 고환 결정 인자로써 존재한다.
이런 zinc-finger domaine 들은 전사를 조절할 수 있다. Zfx 와 Zfy intron 사이의 다양 한 크기는 남성의 Y-specific band를 유발한다.
각 PCR cycle 은 변성, 중합, 증폭 의 세 단계로 구성된다.
1단계에서는 이중가닥의 DNA 가 가열되어 두 개의 상보적인 단일가닥으로 분리된다.
이 단계에서는 두 개의 primer 가 동일한 Tm (melting temperature) 를 갖도록 하기
위해, 각 primer 에 대한 Tm 을 계산하여, 이 수치보다 5℃ 정도 높거나 낮은 온도를
결정하고 실험을 해야 한다. 그렇지 않으며 한 primer 에 대해서는 적절한 annealing
temperature 이지만 다른 primer 에 대해서는 너무 높거나 너무 낮을 수도 있다.
Tm 을 구하는 공식은 다음과 같다.
참고 자료
없음