단백질분리정제 실험보고서

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본문내용

실험 첫째날 (11월1일)

protein 분리

1. 전체 무게측정 (계란은 액상으로 만든다)
- 우리 5조는 ‘계란흰자’만 사용하여 단백질을 추출하기로 했다.

2. Honogerizet(분쇄) : 걸러진 흰자에 H2O(증류수) 100ml을 넣어준다.
3. 상등액만 취한다
4. salting out : A.S(Ammonium sulfate)를 이용해 protein을 얻는다.
5. 시작-> A.S를 다 넣은후 -> 1시간동안 자석 교반기로 돌려준다.

실험내용

1. 계란을 깨어 액상(흰자)만을 분리한다.
2. 거즈(천)을 자른다 ->250ml 새비커를 가져온다 -> 흰자속의 이물질(투명줄기)을 걸러준다 ->새 비커에 거른 흰자를 담는다.
3. 순수한 흰자만 있는 비커에 증류수 100ml을 넣어주고 잘 섞어준다.
(잘 섞은후 1회 다시 거즈로 한번 더 걸러준다)
4. 메스실린더를 이용해 150ml로 맞춘후 다시 비커에 담는다.
5. 덩어리의 A.S를 사발로 곱게 갈아서 준비한다.

<A.S salting out>

Salting out은 녹는 성질을 이용하여 흰자속의 단백질을 흡착후 다운시켜주는 것이다.

1. 도표를 참조하여 보면 69.7g의 A.S를 이용하면 단백질 100% 포화도를 나타낸다.
(우리 5조는 50%의 포화도를 위해 29.1g의 A.S만 150ml의 용액에 넣어주었다.)
2. 100ml기준으로 29.1이기 때문에 150ml의 용액에는 43.56g을 넣어주었다.
3. A.S를 상명저울에서 44g을 달아서 준비한다 -> 1L의 비켜를 준비한다.
(10ml의 흰자 샘플을 얼음 상자속에 넣어 보관한다)
4. 140ml의 흰자용액에 마그네틱바를 넣고 1L의 비커속에 넣고 얼음으로 주위를 채워서
다져준다. 샘플채취로 흰자용액이 140ml이 되었으므로 계산하여 41g의 A.S를 사용하였 다.
(A.S는 0℃에 포화되므로, 얼음을 넣는데 이때, 흰자 용액에 계란이 들어가서는 안된다.)

참고 자료

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