건강기능식품의 인증을 받기위한 동물실험법에 대하여
- 최초 등록일
- 2007.04.17
- 최종 저작일
- 2007.01
- 17페이지/ 한컴오피스
- 가격 2,000원
소개글
체중 1.5 ㎏ 이상의 토끼를 사용한다. 시험에 사용한 토끼를 다시 사용할 경우에는 3일 이상 경과되어야 한다. 다만, 발열성물질시험 양성으로 판정된 검체에 사용한 동물 및 시험하고자 하는 검체와 공통된 항원물질을 함유한 검체를 이전에 주사받은 동물을 사용하여서는 안 된다.
또한 4에서 측정한 대조 체온이 39.9℃ 이상의 동물은 사용하여서는 안 된다.
목차
1. 발열성물질시험법(파이로젠시험법)
2. 항 파상풍 사람 면역글로불린Human Tetanus Immunoglobulin
3. 헤모필루스 인플루엔자 비형·디프테리아 씨알엠(CRM197)단백
접합 백신(알루미늄 흡착)(Haemophilus influenzae type b-Diphtheria CRM197
Conjugated Vaccine, adjuvanted aluminum)
4. 시험방법의 검증(Validation)
5. 참고문헌
본문내용
효소면역측정법(ELISA)
독소 중화능력 측정법과 상관관계가 확인된 효소면역측정법을 이용하여 시험한다. 파상풍독소 항원(이하 항원)이 고정된 웰에 0.01 ~ 7 IU/mL 범위의 항파상풍 사람면역글로불린표준액(이하 표준액) 및 표준액 농도구간에 포함되도록 희석된 검액을 각각 100 μL씩 넣고 30분간 상온에서 반응시킨 후 미반응한 표준액 및 검액을 제거할 수 있는 세척액으로 웰을 3회 세척한다. 다시 발색 효소가 붙어있는 항 사람면역글로불린을 100 μL씩 넣고 30분간 상온에서 반응 시킨 후 세척액으로 웰을 3회 세척한다. 발색 기질을 100 μL씩 넣고 30분간 상온의 어두운 곳에서 반응시킨 후 반응 중지액을 100 μL씩 넣어 반응을 중지시킨다. 30분 이내에 450nm 파장에서 흡광도를 측정하여 표준액 대비 검액의 파상풍 항독소의 함량을 계산한다.
2.2.3 분획
항체를 변질시키지 않도록 적당한 처리법에 의하여 원혈장을 분획하여 면역글로불린-지 분획을 모아서 이를 원획분으로 한다.
2.3 원획분에 대한 시험
0.3 mol/L 아미노초산액으로 용해하여 원획분의 농도가 최종원액에 함유되는 농도와 동등하게 되도록 만든 것을 검액으로 한다.
참고 자료
Stuffness, M. and J. Douros. 1982. Currents status of the NCI plant and animal product program. J. Nat. Prod. 45 :1-14.Stuffness, M. and J. M. Pezzuto. 1991. Assays related to cancer drug discovery. In Method in Plant Biochemistry, vol 6. Assays for bioactivity. K. Hostettmann ed. Academic Press. London. P.71Swain, T. 1977. Secondary compounds as protective agents. Ann. Rev. Plant Physiol. 28:479-501.통계청. 1994. 사망원인 통계년보Umezawa, H. 1973. Studies on bleomycin;chemixtry and the biological action. Biomedicine. 18:459-475.Wiemann, M. C. and P. Calabresi. 1985. Pharmacology of antineoplastic agents. In Medical Oncology. P. Calabresi, P. S. Schein and S. A. Rosenberg des. Macmillan Publishing Co. New York. pp.292-362.임재훈, 우홍정, 김병운, 하윤문, 이승훈, 남상윤, 최용묵. 1987. 수종의 생약에 대한 항암효과의 실험적 연구(II). 약물에 대 한 암세포의 감수성분석. 생약학회지. 18:127-153.