식물의 캘러스 배양 및 형질전환

소개글

담배의 캘러스로부터 유도된 액상의 현탁배양 세포를 배양하고, 형질전환하므로서 식물체로의 유전자 도입을 확인한다.

목차

1. Introduction
1.1. 식물조직 배양의 종류
1.1.1. Callus Culture
1.1.2. Suspension Culture
1.1.3. Protoplast Culture
1.1.4. Hairy Root Culture

1.2. 유용유전자의 식물체로의 도입방법
1.2.1. Aglobacterium을 이용하는 방법
1.2.2. 유전자 직접전입법(direct gene transfer method)
1.2.3. 전기충격법(electroporation)과 polyethylene glycol 이용법

2. Materials and Methods

3. Results

4. Discussion

5. References

본문내용

1) Callus Culture

원식물의 일부 (explant)를 무균 상태로 취하여 이것을 agar가 일부 함유된 배지 (solid media)에 치상하면 일정시간 후 무정형의 세포괴로 자라는 것을 관찰할 수 가 있는데 이것을 callus라 한다. 이렇게 유기된 callus를 영양분이 있는 고체배지에서 배양하는 것을 callus culture라 한다.

2) Suspension Culture

일정시간 세포 분열을 거듭하여 일정크기로 자라게 된 callus를 agar가 들어 있지 않은 액상 배지에 옮기고 shaker에서 진탕하면서 배양하면 cell aggregate 혹은 single cell 상태로 cell들을 자라게 할 수가 있는데 이것은 박테리아나 곰팡이와 같은 미생물의 진탕 배양과 흡사한 형태로서 suspension culture라고 흔히 불린다. 이것은 callus와 같이 unorganized culture에 해당하지만 liquid media내에서 자라게 하므로 영양의 공급이 callus에 비해 풍부하여 세포의 성장이 빠르고 균질한 세포의 상태를 유지하므로 특히 화합물 생산을 위한 갖가지 조작이 손쉽고 다양하기 때문에 2차대사 화합물 생산을 위한 연구에 널리 이용되고 있다.

참고 자료

Bernard R. Glick, Jack J. Pasternak, Molecular Biotechnology 2nd ed. (1998), ASM Press, pp. 427-437.