소개글
"(생명공학실험 A+) 미생물 정성분석, 정량분석"에 대한 내용입니다.
목차
I. Abstract
II. Introduction
1. 정성 분석
2. 정량 분석
III. Materials and Methods
1. 정성 분석
2. 정량 분석
IV. Results - 본인이 실험하고 나온 데이터를 작성
1. 정성 분석
2. 정량 분석
V. Discussion - 실험 데이터에 대한 설명과 해석, 데이터가 왜 이렇게 나왔는지에 대한 본인의 생각을 작성
1. 정성 분석
2. 정량 분석
VI. Conclusion - 실험에 대한 전반적인 내용과 실험 데이터에 대한 요약
본문내용
기능성 미생물의 정성 분석, 정량 분석한다. 정성 분석에서는 생리활성 물질을 생합성 하는 기능성 미생물을 선별(screening)하였다. skim milk, CMC, starch 배지에 각각 Bacillus sp. MBLB1270, Bacillus sp. KIGAM252, Paenibacillus sp. KIGAM275, Bacillus sp. KIGAM416, 총 4가지의 균을 접종하였다. 배양 후 CMC, starch 배지에는 각 congored, Lugol’s Iodine을 떨어뜨린 후 colony 주변 clear zone이 형성되는지 확인하고, clear zone diamater를 측정한다. Clear zone의 형성여부로 activity를 알 수 있다. 본 실험에서는 protease, cellulase, amylase의 활성을 본다. 그 결과, Protease, amylase 활성을 가지는 것은 MBLB1270, KIGAM416 였으며, cellulase의 활성을 가지는 것은 MBLB1270 였다. 또한, GABA를 어떤 미생물이 생산하는지 확인하기 위해 TLC (thin-layer Chromatography)를 이용하였다. GABA의 spot과 같은 위치에 spot이 있으면 glutamic acid decarboxylase의 활성을 가진다. 따라서 HYE1의 GABA 생산을 확인하였다.
정량 분석에서는 Cellulase와 amylase의 경우, DNS 환원당 정량법을 이용해 정량 분석한다. 환원당(glucose)와 발색시약인 DNS의 반응을 이용하여 흡광도 측정을 통해 정량적으로 알 수 있다. 흡광도로 glucose standard curve를 그린다. Amylase의 glucose standard curve는 y = 0.0968x - 0.0207, R² = 0.9986로 나타났으며 Unit은 0.16U/mL이다.
참고 자료
박창호, ‘생명공학기술’, 도서출판 청문각, 2001, 제 3장.
강태진 외, “GABA의 생성과 이용”, J. Kor. Soc. Environ. Eng., 36(4), 265~270, 2014, 2007.
김기은, “단백질 분해효소 생산 균주 분리”, J. Kor. Soc. Environ. Eng.,2014, p.265~270.
S. Chandraju and others, “Estimation of reducing sugar by acid hydrolysis of black grape (Vitis vinifera L.) peels by standard methods”, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 2014, 6(5):862-866.
Jaap H. waterbog and others, “The Lowry Method for protein Quantitation”, methods in Molecular Biology; volum1, 1984.
Radhika Dhakal, “Vivek K. Bajpai, Kwang-Hyun Baek, Production of gaba (γ - aminobutyric acid) by microorganisms:-“ , Yeungnam University, 2011, p.1240~1241.