마우스 간에서 microsomal fraction을 분리하여 약물대사효소의 활성 측정/ 시료 내 단백질의 정량 - prereport

목차

1. 제목
2. 실험원리
3. NADPH - cytochrome 456-reductase
4. 참조문헌

본문내용

Ⅰ. 마우스 간에서 microsomal fraction 분리

① Microsomal mixed function oxidase계와 제 1상 반응

약물대사 효소들은 주로 간과 다른 조직에서 소포체의 지용성 막에 존재한다. 세포로부터 층 모양의 막을 균질화하고 분획하여 분리하면 microsome이라는 소포를 형성하게 된다. 해당 소포는 막의 구조적이고 기능적인 특성을 거의 대부분 그대로 유지하고 있다. 리보솜이 많은rough ER 의 거친 표면의 특성을 가진 거친면과 리보솜이 없는 smooth ER의 특성을 갖는 microsome이 각각 존재한다. 거친면 microsome은 단백질 합성에 관여하지만 매끈면 microsome는 상대적으로 산화적인 약물대사에 관여하는 효소가 풍부하다. 특히 mixed function oxidase또는 monooxygenase의 중요한 효소군을 포함하고 있다.
이 효소들의 작용에는 환원제인 NADPH그리고 산소분자가 필요하게 된다. 기질당 한 분자의 산소가 이용되어 대사산물과 물을 형성하게 된다.
이러한 산화-환원 과정에서는 2개의 microsome효소가 중요하게 작용하게 된다. 첫번째 microsome효소는 플라빈 단백질인 NADPH-cytochrome P450 reductase이다. 이 효소 1몰에는 플라빈 모노뉴클레오티드와 플라빈 아데닌 디뉴클레오타이드 각각 1몰씩이 포함되어 있다. 두 번째 microsome 효소는 헴 단백질인cytochrome P-450으로 최종 단계에서 산화효소로 작용한다.

참고 자료

왕진호, 약물대사 평가시험법 해설서, 식품의약품안전평가원, 2015
실험 미생물학
위키백과
약물학, 한국 약학교육협의회 약물학분과회, 범문에듀케이션, 2018