효소 고정화 - 결과

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최초 등록일
2020.12.24
최종 저작일
2019.06
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목차

1) 실험 제목
2) 실험 일자
3) 보고서 인적 사항
4) 실험 방법
5) 실험 결과
6) 결론 및 고찰
7) 참고 문헌

본문내용

1. 실리카 입자를 이용한 고정화 TIP
① Enzyme solution 제조 : 0.1mg protein을 0.1M Phosphate buffer(pH 7.5) 1ml에 녹인다.
② 10%의 Triton-X 100가 있는 50ml의 toluene을 제조하고, 500rpm으로 stirring 시킨다.
③ 실리카 제조 : 2ml의 TEOS에 1번 과정에서 만든 enzyme solution 1ml를 넣는다.
④ ③번을 만들고 2-3분 뒤에 ②번 용액에 주사기를 이용해 천천히 넣는다.
⑤ 용액이었던 것이 겔화가 되면서 얻은 bead를 filtration을 통해 얻고 증류수로 4번 세척한다.
⑥ Bead 안에 효소가 얼마나 있는지 알기 위해 BCA assay를 통해 단백질 양을 분석한다.
⑦ 고정전의 효소와 sol-gel을 이용해 고정된 효소의 활성을 측정하고, 비교해본다.

2. BCA를 이용한 단백질 정량 분석
미지 시료의 단백질 농도를 알아내기 위해 다양한 방법들이 고안되었다. 그 중 가장 간단한 방법은 흡광도 측정을 이용한 단백질의 정량분석이다. 흡광도는 농도에 비례하는 성질을 가지고 있다.

참고 자료

“화공생물공학실험”, 동국대학교 화공생물공학과, 2016, pp. 61-67
김준형, Beer-Lambert 법칙에 입각한 다채널 TRO 측정장치 연구, 대한전자공학회, 2014
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