간조직을 이용한 핵산 추출 및 DNA,RAN 정성실험
- 최초 등록일
- 2020.11.05
- 최종 저작일
- 2020.11
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소개글
"간조직을 이용한 핵산 추출 및 DNA,RAN 정성실험"에 대한 내용입니다.
목차
1. 실험의 목적
2. 실험 원리
3. 배경지식 및 이론
4. 실험기구 및 시약 (강산 시약 多 주의)
5.실험방법
6. 실험의 결과
7. 고찰 및 토의
8. 참 고 문 헌
본문내용
1. 실험의 목적
핵산의 추출 실험을 통해 방법과 원리를 숙지한다.
2. 실험 원리
대부분의 핵산은 세포 내에서 단백질과 복합체를 이루면서 존재 한다. 이러한 핵단백질은 세포의 중요한 단백질의 하나이다. 이번 실험은 불필요한 단백질과 복합체(글리코겐, 다당류, 지방) 분리하여, 유리된 상태의 핵산을 추출한다.
우리 는 소간 속 핵산을 추출할려고 한다. 추출하기 위해서 크게 TCA용액(2.5,5,10%)과 95%에탄올을 사용한다. TCA용액은 trichloroacetic acid로, 화학식 CCl3COOH으로 초산(CH3COOH) H에대신 염소가 들어간 염산이다. 농도가 가장 낮은 2.5% TCA는 글리코겐이 잘 추출된다.
2.5%TCA사용하여 필요 없는 글리코겐을 제거하고, 지방,다당류등을 95% 에탄올로 제거한다.10% TCA사용과 가열함으로서 ph(1-2)에 의한, 가열에 의한 단백질 변성이 되어 침전된다.총 원심분리를 5번 통해 분리를 통해 불필요한 성분들을 제거한다.
침전물에 95% 에탄올을 넣는다. 한번더 원심분리를 하는데, 상등액에는 지방들이 완전한건 아니지만 분리된다. 침전물에는 증류수와 10% TCA시약을 넣어준다. 침전물에는 거의 핵산과 단백질이 남아 있다. 거기에 물과 10%TCA를 넣고 반응이 되도록 잘 흔든 다음, 중탕해서 넣어준다. 단백질은 변성이 되어 가라앉고, 상등액은 핵산이 추출되어 만들어진다.부분적으로 RAN와DAN의 가수 분해된다.
추출된 핵산은 염기,당,인산로 연결되어 있는 폴리 뉴클레오티드이다.앞실험에서 TCA인 산을 가하면서 인산과 염기는 떨어져 나가고 당만 남게 된다. 산성을 띈 Orcinol과 diphenylamine시약 사용하여 DAN,RAN 존재유무를 구분 지을수 있다.
핵산에는 크게 DNA와 RAN이다. 그를 구성하는 것은 뉴클레오타이드이다. 인산결합이 되어 있는데 이것이 분해되면서 뉴클레오타이드가 떨어진다. 단백질 분해도 되고, 뉴클레오 단위도 떨어지면서 가수분해된다. 침전물에는 단백질이 있고, 상등액은 핵산 추출물이 있다. 한번 더 침전물에 남아 있는 핵산을 추출하기 위해서 더 와이드하게 하기 위해, 5%TCA넣고 흔들면 남아 잇는 핵산은 잘 녹아 내리지 않지만 남아 있는 단백질은 녹아낸다. 두 개의 상등액을 합친 것으로 핵산 추출액이다. 핵산 추출액에는 DNA와 RAN가 있다.강산에 의하여 뉴클레오타이드가 분리되어 있는 상태이다.
참고 자료
[네이버 지식백과] 단백질의 합성 (통합논술 개념어 사전, 2007. 12. 15., 청서출판)
연애할때 듣기좋은노래
https://search.naver.com/search.naver?sm=tab_hty.top&where=nexearch&oquery=DNA+600%E3%85%9C%E3%85%A1&ie=utf8&query=DNA+600nm
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=190594021&qb=RE5BIDYwMG5t&enc=utf8§ion=kin&rank=5&search_sort=0&spq=0&pid=TuszalpySo8sssIfXEssssssssZ-467743&sid=4Xtb2FSp9EGRWZryegHhtQ%3D%3D
http://www.happycampus.com/doc/2858834
http://www.happycampus.com/search/?type=all&campaign_type=&isCoverBest=&tag=&qu=%ED%95%B5%EC%82%B0+%EC%9B%90%EC%8B%AC%EB%B6%84%EB%A6%AC+
http://www.happycampus.com/doc/14415738