줄기세포의 유전자와 단백질 발현 분석

줄기세포
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최초 등록일
2020.07.03
최종 저작일
2020.06
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소개글

"줄기세포의 유전자와 단백질 발현 분석"에 대한 내용입니다.

목차

I. 목적

II. 서론
1. 유전자 발현 분석
2. 단백질 분석

III. 실험재료 및 방법
1. RNA isolation
2. Immunofluorescence protocol for adherent cells

IV. 결과

V. 고찰

본문내용

목적 :
줄기세포의 유전자,단백질을 추출 및 분석함으로써 줄기세포만의 특징을 알아본다.
서론 :
● 유전자 발현 분석
▶전기영동(Electrophoresis)
Electrophoresis는 DNA, RNA, protein을 그들의 size, charge에 따라 분리하는 기술이다. 물질이 이동하는 속도는 그 입자의 전하량, 분자량에 따라 다르게 나타난다. 이 성질을 이용해서 DNA, RNA, 단백질을 분리할 수 있다. 그리고 각 물질에 맞는 다양한 실험방법이 존재하는데 이번 실험은 RNA를 분리하는 실험으로 Gel electrophoresis로 RNA를 분리시켜 원하는 유전자의 존재를 확인했다.Gel electrophoresis의 매질로 쓰이는 gel은 agarose gel과 polyacrylamide gel이 있다.한천에서 추출한 성분인 agarose로 만들어지는 agarose gel은 미세한 그물망 구조로 되어있어 RNA가 그물망을 비집고 +극으로 이동하게 된다. agarose gel에 포함된 agarose의 양에 따라 실험결과가 달라지는데 agarose gel에서 agarose의 비율을 높일수록 그물망이 더 촘촘해지고RNA의 이동속도가 느려져서 좀 더 정밀한 단위로 RNA를 분리할 수 있다. polyacrylamide gel은 agarose gel 보다 촘촘해서 더 작은 분자의 RNA분리에 이용된다. RNA를 확인하기 위해서 여러 염색약을 사용하는데 염색약은 EtBr을 주로 사용했지만 EtBr은 휘발성이 강한 발암물질이라서 대체품을 사용하기도 한다. EtBr은 이중결합을 이루고 있는 핵산의 염기 사이로 들어가서 결합하는 성질이 있고 DNA나 RNA에서 부분적으로 이루고 있는 이중결합염기와 결합하게 되면 형광이 강하게 나타나서 UV로 DNA나 RNA의 위치를 표현해준다.이런 원리로 DNA와 RNA의 염색약으로 사용된다.

참고 자료

“What is electrophoresis?”, Cleaver Scientific
https://www.cleaverscientific.com/what-is-electrophoresis/
“Electrophoresis”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Electrophoresis
“An Introduction to Gel Electrophoresis – DNA, RNA & Proteins”, expedeon an abcam company
https://www.expedeon.com/resources/applications/introduction-to-dna-and-protein-gel-electrophoresis/
“Gel electrophoresis”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Gel_electrophoresis_of_nucleic_acids
“The principle of Real Time PCR, Reverse Transcription, quantitative rt-PCR”, YouTube
https://www.youtube.com/watch?v=DH7o9Df5_50
“[Dyne 23rd 기초실험방] Quantitative Real-Time PCR”, 다인바이오
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=26
“melting curve analysis”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Melting_curve_analysis
“Western blot”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Western_blot
Mahmood, T., & Yang, P. C. (2012). Western blot: technique, theory, and trouble shooting. North American journal of medical sciences, 4(9), 429–434. https://doi.org/10.4103/1947-2714.100998
“[Dyne 12th 기초 실험방] Western blot”, 다인바이오
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=14&sst=wr_hit&sod=desc&sop=and&page=1
“Immunohistochemistry”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Immunohistochemistry
“[TechNote] ImmunoHistoChemistry(IHC) Technical Note”, SeouLin Bioscience
http://www.seoulin.co.kr/contact-center/data/?mod=document&uid=255
Ross, Michael H, and Wojciech Pawlina. Histology: A Text and Atlas : with Correlated Cell and Molecular Biology. Baltimore, MD: Lippincott Wiliams& Wilkins, 2006. Print.
“Immunofluorescence”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Immunofluorescence
“NanoDrop One User Guide- Korean”, Thermo Scientific
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