PCR report

최초 등록일
2020.07.03
최종 저작일
2020.06
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소개글

"PCR report"에 대한 내용입니다.

목차

I. 배경
1. PCR의원리
2. PCR의 과정별 역할
3. PCR의응용분야

II. 목적

III. 방법
1. 실험재료
2. 실험방법

IV. 고찰

V. Figure

본문내용

■ PCR의원리
PCR의 원리는 특정 DNA 부위를반복적으로 복제하여 특정 DNA부위를 증폭시키는 방법이다.간단한 방법으로 아주 적은 양의 DNA를 실험적으로 사용하기 충분한 많은 양으로 증폭시킬 수 있어 분자 생물학적 연구에 도움이 되는 매우 큰 발견이었다.증폭의 원리는 온도에 따른 DNA의 구조 변화와 polymerase를 이용한 DNA의 복제를 반복시키는 것이다.Polymerase는 생명체에서 분열,번식을 위해 DNA를 복제할 때 template DNA의 서열에 상보적인dNTP를 결합시켜하나의 DNA를 동일한 서열을 가진 2개의 DNA로 복제하는 효소이다.즉, polymerase는 single stranded DNA를double stranded DNA로 만들어주는 능력을 가진 효소이다. 이 효소를 추출해 In vitro에서 DNA를 복제하도록 하는 것이PCR의 원리이다.
■ PCR의 과정별 역할
Polymerase는 single stranded DNA를 double stranded DNA로 만들어주는 능력은 있지만 double stranded DNA를 single stranded DNA로 만들어주는 능력은 없다.생명체 내에서는 여러가지 효소의 작용으로 double stranded DNA를 single stranded DNA로 분리하고 primer를 붙여주는 등 다양한 역할로 polymerase가 작용할 수 있도록 해주지만PCR은온도에 따른 DNA의 구조 변화를 이용해 다양한 효소들의 역할을 대신했다.PCR에 이용하는 온도의 단계는크게 3단계로 나눌 수 있는데 각 단계의 특징을 알아보겠다.
Denaturation
DNA는 수많은 염기들 사이의 H-bond를 통해 이중 결합을 이루고 있다. DNA 복제를 위해서는 DNA의 이중결합을 끊어 double stranded DNA를 single stranded DNA로 분리해야 한다.

참고 자료

“PCR”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Polymerase_chain_reaction
“[Dyne 1st기초 실험방] PCR 기본 원리”, 다인바이오
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=3&page=3
“Polymerase Chain Reaction (PCR)”, Sigma Aldrich
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/articles/biology/polymerase-chain-reaction.html
“The principle of Real Time PCR, Reverse Transcription, quantitative rt-PCR”, YouTube
https://www.youtube.com/watch?v=DH7o9Df5_50
“[Dyne 23rd 기초실험방] Quantitative Real-Time PCR”, 다인바이오
http://www.dynebio.co.kr/yc/bbs/board.php?bo_table=data1&wr_id=26
“Sanger sequencing”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Sanger_sequencing
“Sanger sequencing”, Sigma Aldrich
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/articles/biology/sanger-sequencing.html
“Taq polymerase”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Taq_polymerase
“nested PCR”, Wikipedia
https://en.wikipedia.org/wiki/Nested_polymerase_chain_reaction
“Nested Polymerase Chain Reaction”, ScienceDirect
https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/nested-polymerase-chain-reaction

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