miniprep(미니프렙) 실험보고서
- 최초 등록일
- 2020.02.14
- 최종 저작일
- 2019.08
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소개글
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목차
1. 목적
2. 실험방법
3. 결과
4. 고찰
참고문헌
본문내용
1. 목적:
이번 실험은 박테리아의 세포(E. coli)로부터 세포막과 벽을 부수어 Recombinant Plasmid DNA를 분리하는 것을 목적으로 하는 실험이다. 실험명칭은 Miniprep이라고 한다. 분리하는 과정에서 Chromosomal DNA와 Plasmid DNA로 나누어지게 되는데 실험과정을 거치고 원심분리를 하게 되면 Chromosomal DNA는 분자량이 크기 때문에 밑으로 가라앉고 상등액에는 Plasmid DNA가 있게 되는데 여기서 Plasmid DNA를 얻을 것이다.
실험에 사용한 plasmid:
Plasmid 분리에 사용하는 시약
① SolutionⅠ - glucose, Tris-Cl, EDTA, RNase
* EDTA는 세포벽의 integrity를 유지하는데 필수적인 calcium ion을 제거하여 세포벽이 군데군데 무너지게 한다. 이때 glucose는 삼투압을 유지시켜 세포의 외형을 유지시켜준다. 이 과정에서 실험상 vortex를 해야 하는데 이 때 세포가 완전히 깨지게 되면 chromosomal DNA가 잘 깨지게 되어 plasmid DNA와 구분할 수 없게 된다.
참고 자료
https://m.blog.naver.com/PostView.nhn?blogId=hafs_snu&logNo=221108898928&proxyReferer=https%3A%2F%2Fwww.google.com%2F
유전자대사 실습PPT
https://en.wikipedia.org/wiki/Plasmid_preparation
http://www.addgene.org/9022/
