[A+] 미생물학/면역학 실험 : ELISA 결과 레포트

소개글

약학대학 과정의 미생물/면역학 실험 레포트입니다.
(다른 자연과학 미생물/면역학 실험 과목의 과정과 거의 같습니다.)
긴말하지 않겠습니다.
A+ 받았던 결과보고서 입니다. 특히 DIscussion(고찰) 부분은 자신있습니다.
받아보시면 절대 후회하지 않으실겁니다.
실험 결과 사진 및 계산 과정 등이 모두 상세히 기술되어 있습니다.

목차

1. Title

2. Abstract

3. Introduction
1) ELISA 란?
2) ELISA 의 종류
3) ELISA Workflow 및 원리

4. Method
1) Preparation of Buffers and Reagents
2) Coating with Capture antibody
3) Blocking and Adding Samples
4) Incubation with Detection antibody and then Secondary antibody
5) Analysis of data

5. Result

6. Discussion

7. References

본문내용

1. Title : ELISA

2. Abstract
- ELISA
- Direct ELISA
- Indirect ELISA (Sandwich ELISA)
- Monochronic & Polychronic Antibody

3. Introduction
1) ELISA 란?
효소면역정량법 (ELISA, Enzyme-Linked Immunosorbent/Immunospecific Assay)는 오늘날 가장 널리 이용되는 면역정량법이다. 이 방법은 Ag-Ab interaction을 이용하여 Ag or Ab를 정성, 정량할 수 있는 감도가 매우 우수한 실험법(수 ng/mL)이다. 이 방법은 항체에 효소를 결합시켜 항원-항체 반응을 확인하는 방법으로, 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능하여 현재 가장 널리 쓰이고 있는 항원-항체 분석법의 하나가 되고 있다. 1970년대 초 프랑스(Avrameas와 Guilbert, 1971년)와 스웨덴(Engvall과 Perlman, 1971년)의 두 그룹에 의해 동시에 고안되었다. 이후, ELISA 의 많은 변형 이 서로 다른 상황에서 개발되고 사용되어 왔지만, 모두 아래 네 가지 동일한 기본 요소에 따라 달라진다.

<중 략>

1. Methods
① Bicarbonate/carbonate coating buffer (100 mM)
- Antigen이나 antibody가 희석된 용액을 만들 때 쓰인다.
- 3.03g Na2CO3, 6.0g NaHCO3, 1000 ml의 D.W.를 넣어 만든다.
- pH meter기를 이용해 pH가 9.6이 되도록 만든다.
② PBS
- 1.16g Na2HPO4, 0.1g KCl, 0.1g K3PO4, 4.0g NaCl, 500ml의 D.W.를 넣어 만든다.
- pH meter기를 이용해 pH가 7.4가 되도록 만든다.
③ Blocking solution
- 통상적으로 사용되는 blocking buffer는 1% BSA(bovine serum albumin)을 사용한다.

참고 자료

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Lamberg A, Helaakoski T, Myllyharju J, Peltonen S, Notbohm H, Pihlaja-niemi T, Kivirikko KI: Characterization of human type III collagen expr-essed in a baculovirus system - Production of a protein with a stable triple helix requires coexpression with the two types of recombinant pr-olyl 4-hydroxylase subunit. Journal of Biological Chemistry 1996, 271:11988 -11995.
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Vuorela A, Myllyharju J, Nissi R, Pihlajaniemi T, Kivirikko KI: Assem-bly of human prolyl 4-hydroxylase and type III collagen in the yeast Pichia pastoris: formation of a stable enzyme tetramer requires coexpr-ession with collagen and assembly of a stable collagen requires coexpr-ession with prolyl 4-hydroxylase. Embo Journal 1997, 16:6702-6712.
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