실험4 단백질 정량 분석- 결과

최초 등록일
2019.12.26
최종 저작일
2017.11
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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result & Discussion
4. Conclusion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
이번 실험은 Lowry법을 이용하여 단백질의 정량을 분석하는 실험이었다. 미리 농도를 알고 있는 단백질 샘플을 이용하여 흡광도를 측정해서 BSA Standard curve를 그린다. 그리고 이를 이용하여 미지의 농도를 가진 단백질의 흡광도를 측정하여 농도를 알아내는 것이다.
4가지 농도의 BSA 샘플을 만들고 Lowry 시약을 넣고 기다리고, Folin & Ciocalteu’s Phenol 시약을 넣고 색 변화를 기다린 후 흡광도를 측정하면 끝이 나는 실험이었다. 흡광도를 측정할 때 원래 최적의 파장대를 직접 찾아야 하는데 726nm에서 최대의 흡광도라고 알려주셔서 그렇게 설정하고 측정하였다. 단백질 샘플과 미지의 용액의 흡광도를 모두 측정하고 실험은 끝이 났다.
흡광도를 측정한 후 이를 이용해 BSA Standard curve를 작성하여 미지의 단백질 용액의 농도를 알 수 있었다.
다음과 같은 BSA Standard curve가 나왔고, 여기에 미지의 용액의 흡광도를 y값에 대입하여 x값을 구하면 단백질의 농도를 알 수 있었다.

2. Experiment
원래의 실험 방법은 BSA 원액과 증류수를 이용하여 희석하여 50, 100, 150, 200의 BSA 샘플을 만드는 것부터 시작을 한다. 그런데 단백질의 양이 충분하지 않고 실수하기 쉬워서 조교님이 희석시키는 과정까지는 해주고 시작하였다.
이때 희석시키는 방법은 아주 간단하였는데, 200는 그대로 사용하고, 100를 만들기 위해서는 200짜리 BSA 용액 100와 증류수 100를 넣어주면 된다. 같은 방식으로 150, 50의 BSA 샘플도 만든다. 이렇게 모든 용액이 200이 되게 된다.
추가로 미지의 단백질 농도를 가진 용액 2개를 만들었는데, 나중에 이 샘플의 농도를 알아내는 것이 실험의 목표였다.

참고 자료

화공기초이론실험2 실험노트”
google (단백질 정량 강의자료)
http://www.virtual-lab.or.kr/demo/Experiment_PnP.asp?gCNum=10202

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