pGal 플라스미드로 대장균 형질전환 하기

소개글

pGal 플라스미드로 JM109를 형질전환 시키고 X-gal을 이용하여 선별한다.
직접 실험 진행하였습니다. 고찰 매우 자세히 기입하였습니다. 준비물, 실험 과정 매우 자세합니다.
중간 실험 과정 사진 첨부되어있습니다.

목차

1. 실험 일시
2. 실험 목적
3. 이론적 배경
4. 시약 및 실험 기구
5. 실험 과정
6. 결과
7. 결론 및 고찰
8. 참고문헌

본문내용

II. 실험 목적
pGal 플라스미드로 JM109를 형질전환 시키고 X-gal을 이용하여 선별한다.

III. 이론적 배경
1. 형질전환
1) 정의
형질전환은 외래 DNA 분자가 세포에 도입되어 유전적인 변화가 일어난 것을 의미한다. 세균이 다른 세균의 DNA를 받아들여 자신의 염색체에 삽입하는 것이다. 형질전환은 무성생식을 하는 세균 등의 미생물이 유전적 다양성을 확보할 수 있는 생존 전략이다.

2) 방법
가) 화학적 방법
대장균과 같은 그램 음성 세균의 형질전환에 널리 사용되는 방법은 염화칼슘() 처리법이다. 2가의 양이온은 세포막의 유동성을 높여주고, 세포 표면의 인지질, lipopolysaccharide(LPS)의 음전하를 중화시켜, 음전하를 띈 DNA의 세포 표면 결합 및 통과를 촉진시키는 것으로 알려졌다. 형질전환시에 염화칼슘으로 처리한 세포에 열충격을 주는데, 이는 세포 구멍이나 손상된 세포벽을 통한 DNA의 세포내로의 이동을 촉진하는 효과가 있다.

참고 자료

[네이버 지식백과] 형질전환 [transformation] (미생물학백과 ), https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144996&cid=61232&categoryId=61232
네이버 블로그, 다니엘 수능 생물 오답노트, 유전자의 형질발현, http://lifelog.blog.naver.com/PostThumbnailView.nhn?blogId=genetic2002&logNo=30001808165&categoryNo=4&parentCategoryNo=
네이버 블로그, 작전명 공부하는 대학생들, 플라스미드 DNA 미니프렙, https://blog.naver.com/hafs_snu/221108898928