western blot 실험

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실습 및 수업의 목적
- western blotting을 통하여 SDS-PAGE로 분리해낸 단백질 중 특정 단백질의 존재 여부를 밝힌다.

<실험 재료>
-기기: Buffer tank lid, Electrode assembly, Gel holder cassette and foam pads, Blue cooling unit, Mini Trans-Blot cell ~ Wet transfer system 사용

<중 략>

<실험방법 및 결과>
1. Transfer proteins to a membrane
① 전기영동이 끝나기 전에 dish에 3M paper 4장, nitrocellulose membrane 1장(하늘색 종이 제거), filter sponge 2장을 미리 1x transfer buffer에 담아둔다. 전기영동이 끝난 SDS-PAGE gel은 조심히 떼어낸 다음, 1x transfer buffer에 담아둔다.
② 오른쪽 그림에 보이는 순서대로 쌓은 후, 15ml conical를 fiber pad위로 가볍게 굴려서 공기방울을 제거한다.(공기방울을 제거해야 transfer가 깔끔하게 진행됨)

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