생명공학실험. 흡광도 기반 미생물의 생장 관찰(세균)

최초 등록일
2019.01.24
최종 저작일
2018.10
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목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials
4. Methods
5. Results
6. Discussion
7. Conclusion
8. References

본문내용

Abstract
정량분석법 중 하나인 UV-Visible Spectrophotometer를 이용하여, batch culture에서 증식하는 미생물(E. coli)의 농도를 OD600으로 측정해보았다. 측정값을 이용하여 cell growth curve를 그려, 배양시간에 따른 phase를 관찰하였다. 본 실험에서는 9시간에 걸쳐 cell growth curve를 그렸으며, 0~1h에서 0.032~0.061로 약간의 증가가 보였지만 다른 구간에 비해 기울기가 0에 가까워 Lag phase로 여길 만하다. 1~9h에는 세포수가 0.061~1.864로 꾸준히 증가하였으므로, Log phase이다. 시간이 넉넉하지 않아 Log phase이후의 양상은 관찰하지 못했다.

Introduction
원심분리기(Centrifuge)
축을 중심으로 물질을 회전시켜 원심력을 가하는 장치이다. 혼합물을 Centrifuge에 넣고 돌리면 구성하는 물질의 질량에 따라 원심력이 달라진다. 원심력 = 질량 * 원의 반지름 * 각속도2 이며, 원 바깥으로 작용하는 힘이다. 대개 물질의 질량이 원심력을 결정하고 큰 원심력을 받을수록 더 아래로 가라앉는다. 즉 상대적인 밀도차를 이용하여 물질의 분리, 정체, 농축에 쓰인다. 사용시, 장비내부는 물기가 없도록 주의하고 무게 밸런스를 맞춰야 한다. 튜브의 개수를 짝수로 맞추어 평형을 맞춘다(대칭!). 이번 실험에서는 Centrifuge를 13000rpm, 5분, 4°C로 맞추고, cell을 가라앉히는데 사용하였다. 온도가 낮을수록 세포가 잘 보인다고 조교님께서 말씀해주셨다.

UV-Visible Spectrophotometer(자외선-가시광선 분광광도계)
분광광도법은 빛을 측정 물체에 가했을 때, 빛의 파장에 따라 투과, 반사 되는 특징을 이용하여 정량분석 하는 기기이다.
① 흡광도법 :일반적으로 빛이 물체에 닿으면 빛은 물체의 표면에서 반사되거나 흡수되거나 물체를 투과하는 빛으로 나누어진다.

참고 자료

Madian et al, 오계현, 『핵심미생물학』, 바이오사이언스출판, 2013, p155~180/ 204~215
Campbell et al, 전상학, 『캠벨 생명과학』, 바이오사이언스출판, 2016, p481~483/ 591~596
고정삼 et al, 『생물공학』, 유한문화사, 2009, p50~54/ 76~77
Blamire, John. "Effect of pH on Growth Rate". Brooklyn College. Retrieved 8 October 2016.

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